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β-半乳糖苷酶試驗(yàn)的原理和方法

β-半乳糖苷酶試驗(yàn)的原理和方法是什么?為了幫助檢驗(yàn)職稱考生了解,助力檢驗(yàn)職稱考生復(fù)習(xí),醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家整理如下:

(1)原理:有的細(xì)菌可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶,能分解鄰硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG),而生成黃色的-硝基酚(O-nitrophenol),在很低濃度下也可檢出。

(2)試劑:0.75MONPG溶液:取80mg溶于15ml蒸餾水中,在加入緩沖液(6.9gNaH2PO4,溶于45ml蒸餾水中,用30%NaOH調(diào)整pH為7.0,再加水至50ml)5ml,置于4℃冰箱中保存。ONPG溶液為無色,如出現(xiàn)黃色,則不應(yīng)再用。

(3)方法:從培養(yǎng)基上取菌,于0.25ml無菌生理鹽水中制成菌懸液,加入一滴甲苯并充分振搖,使酶釋放。將試管置37℃水浴5分鐘,加入0.25mlONPG試劑,水浴20分鐘~3小時(shí)觀察結(jié)果。

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以上“β-半乳糖苷酶試驗(yàn)的原理和方法”信息由醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家整理,希望對(duì)各位檢驗(yàn)職稱考生有所幫助,更多資訊、考試動(dòng)態(tài)、輔導(dǎo)精華、考試經(jīng)驗(yàn)、輔導(dǎo)課程請(qǐng)關(guān)注醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)!

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