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ONPG的概念

ONPG的概念是檢驗技士|檢驗技師|主管檢驗技師考試的重要知識點,為了幫助大家了解,小編為大家整理出如下相關(guān)內(nèi)容:

(1)原理:有的細菌可產(chǎn)生β-半乳糖苷酶,能分解鄰硝基酚β-D-半乳糖苷(ONPG),而生成黃色的-硝基酚(O-nitrophenol),在很低濃度下也可檢出。

(2)試劑:0.75M ONPG溶液:取80mg溶于15ml蒸餾水中,在加入緩沖液(6.9gNaH2PO4,溶于45ml蒸餾水中,用30%NaOH調(diào)整pH為7.0,再加水至50ml)5ml,置于4℃冰箱中保存。ONPG溶液為無色,如出現(xiàn)黃色,則不應(yīng)再用。

(3)方法:從培養(yǎng)基上取菌,于0.25ml無菌生理鹽水中制成菌懸液,加入一滴甲苯并充分振搖,使酶釋放。將試管置37℃水浴5分鐘,加入0.25ml ONPG試劑,水浴20分鐘~3小時觀察結(jié)果。

(4)結(jié)果:菌懸液呈現(xiàn)黃色為陽性反應(yīng),一般在20~30分鐘內(nèi)顯色。

(5)應(yīng)用:迅速及遲緩分解乳糖的細菌ONPG試驗為陽性,而不發(fā)酵乳糖的細菌為陰性。本實驗主要用于遲緩發(fā)酵乳糖菌株的快速鑒定。

衛(wèi)生資格考試公眾號

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