公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試中，多肽鏈的分離是一個(gè)重點(diǎn)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理如下：

　　在測定一個(gè)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)以前，首先必須保證被測蛋白質(zhì)的純度，使結(jié)果準(zhǔn)確可靠。其次要了解它的分子量和亞基數(shù)，按照其亞基數(shù)將蛋白質(zhì)分成幾個(gè)多肽鏈。

　　1）肽鏈的拆開

　　蛋白質(zhì)分子多肽鏈的連接有共價(jià)結(jié)合和非共價(jià)結(jié)合兩種。要拆開以共價(jià)結(jié)合的-S-S-連接的多肽鏈，必須采用的化學(xué)處理方法常有：

　?、龠^甲酸氧化

　　用氧化劑過甲酸斷裂-S-S-.這個(gè)反應(yīng)一般在0℃下進(jìn)行2小時(shí)左右，兩個(gè)S就全部能轉(zhuǎn)變成磺酸基，這樣被氧化的半胱氨酸稱為磺基丙氨酸。

　　如果蛋白質(zhì)分子中同時(shí)存在半胱胺酸，那么也會被氧化成磺基丙氨酸。此外甲硫氨酸和色氨酸也可被氧化，從而增加分析的復(fù)雜性。

　?、趲€基乙醇還原

　　利用還原劑巰基乙醇亦可使蛋白質(zhì)的-S-S-斷裂。當(dāng)高濃度的巰基乙醇在pH8？條件下室溫保溫幾小時(shí)后，可以使-S-S-定量還原為桽H.與此同時(shí)反應(yīng)系統(tǒng)中還需要有8摩爾脲或6摩爾鹽酸胍使蛋白質(zhì)變性，多肽鏈松散成為無規(guī)則的構(gòu)型，此時(shí)還原劑就可作用于-S-S-.此反應(yīng)是可逆的，因此要使反應(yīng)完全，疏基乙醇的濃度必需在0.1-0.5摩爾。

　?、跜leland試劑的還原作用

　　Cleland′s指出二硫赤蘇糖醇（dithioerythriotol）及二硫蘇糖醇（dithiothriotol）在氧化還原能力上是比較強(qiáng)的試劑，只要0.01摩爾就能使蛋白質(zhì)的-S-S-還原，反應(yīng)基本與疏基乙醇相似，且在許多球蛋白反應(yīng)中，可以不用變性劑。

　　Cleland試劑首先與蛋白質(zhì)-S-S-形成中間物，反應(yīng)終了，還原劑被氧化形成一個(gè)穩(wěn)定的六環(huán)化合物，蛋白質(zhì)則被還原。

　　還原蛋白不穩(wěn)定，SH基極易氧化重新生成-S-S-鍵。穩(wěn)定SH基的方法有：

　　（A）烷基化試劑使SH基轉(zhuǎn)變?yōu)榉€(wěn)定的硫醚衍生物。

　　如果碘代乙酰胺代替碘代乙酸，其產(chǎn)物S羧氨甲基衍生物不帶電荷，磺代乙酸也可與組氨酸、蛋氨酸和賴氨酸發(fā)生反應(yīng)，但反應(yīng)條件不同，可通過各種pH及反應(yīng)時(shí)間進(jìn)行控制。

　?。˙）氨乙基化

　　蛋白質(zhì)分子的幾條肽鏈若以非共價(jià)健結(jié)合，則用尿素、鹽酸胍等變性劑即可拆開。蛋白質(zhì)的多肽鏈被拆開后，將它分離純化，一般多用凝膠過濾、離子交換、電泳等方法，茲不贅述。

　　分離純化后的每條肽鏈還要進(jìn)一步分析其末端。