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概念:蛋白質(zhì)從溶液中析出的現(xiàn)象稱為沉淀。
常用的方法:
1.鹽析:在蛋白質(zhì)溶液中若加大量中性鹽,蛋白質(zhì)膠粒的水化層即被破壞,其所帶電荷也被中和,蛋白質(zhì)膠粒因失去這兩種穩(wěn)定因素而沉淀。此種沉淀過程稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉和氯化鈉等。鹽析沉淀的蛋白質(zhì)不發(fā)生變性是其優(yōu)點,缺點是沉淀的蛋白質(zhì)中混有大量中性鹽,必須經(jīng)透析除去。
2.重金屬鹽沉淀蛋白質(zhì):重金屬離子如Ag十、Hg2+、Cu2十、Pb2十等,可與蛋白質(zhì)的負離子結合,形成不溶性蛋白質(zhì)沉淀。沉淀的條件為pH稍大于蛋白質(zhì)的pI為宜。
3.生物堿試劑與某些酸沉淀蛋白質(zhì):生物堿試劑如苦味酸、鞣酸、鎢酸等以及某些酸,如三氯醋酸、磺酸水楊酸、硝酸等,可與蛋白質(zhì)的正離子結合成不溶性的鹽沉淀。沉淀的條件是pH﹤PI. 4)有機溶劑沉淀蛋白質(zhì):可與水混合的有機溶劑醫(yī)學|教育網(wǎng)|整理,如酒精、甲醇、丙酮等能與蛋白質(zhì)爭水,破壞蛋白質(zhì)膠粒的水化膜,使蛋白質(zhì)沉淀析出。在常溫下,有機溶劑沉淀蛋白質(zhì)往往引起變性。
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