
稀釋法中,如何確定初始菌液濃度?
在進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí),確定初始菌液濃度是確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性和可重復(fù)性的關(guān)鍵步驟。通常情況下,可以通過(guò)以下幾個(gè)步驟來(lái)確定初始菌液的濃度:
1.首先,從培養(yǎng)基中取一定量的待測(cè)細(xì)菌懸液,使用無(wú)菌生理鹽水或肉湯進(jìn)行稀釋。這個(gè)過(guò)程可能需要多次稀釋?zhuān)垣@得適合計(jì)數(shù)的菌液濃度。
2.然后,采用平板計(jì)數(shù)法或者比濁法來(lái)初步估計(jì)菌液中的細(xì)菌數(shù)量。平板計(jì)數(shù)法是將一定量的稀釋后的菌液均勻涂布在瓊脂平板上,經(jīng)過(guò)適當(dāng)溫度和時(shí)間培養(yǎng)后,根據(jù)形成的菌落單位(CFU)數(shù)目來(lái)計(jì)算原始菌液中細(xì)菌的數(shù)量。而比濁法則利用特定波長(zhǎng)下菌懸液的吸光度與菌濃度之間的線(xiàn)性關(guān)系,通過(guò)測(cè)量吸光度值間接估算菌數(shù)。
3.根據(jù)上述方法得到的結(jié)果調(diào)整稀釋倍數(shù),使得最終用于實(shí)驗(yàn)的菌液濃度達(dá)到所需的標(biāo)準(zhǔn)范圍。例如,在進(jìn)行抗生素敏感性測(cè)試時(shí),需要將菌液濃度調(diào)整至0.5麥?zhǔn)蠁挝唬∕cFarland standard),這相當(dāng)于大約1-2×10^8 CFU/ml的大腸桿菌懸液。
4.最后,再次確認(rèn)最終稀釋后的菌液濃度是否符合實(shí)驗(yàn)要求。如果必要的話(huà),可以重復(fù)上述步驟直到獲得準(zhǔn)確的初始菌液濃度。
通過(guò)這些步驟,我們就可以較為準(zhǔn)確地確定用于微生物檢驗(yàn)的初始菌液濃度了。