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[寄生蟲學]第三節(jié) 寄生蟲實驗動物保種

2007-08-25 11:19 來源:
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  第三節(jié) 寄生蟲實驗動物保種

  寄生蟲的動物保種,是將其感染期接種于實驗動物,使蟲體在動物體內存活,以利于寄生蟲與寄生蟲病的研究、寄生蟲病診斷以及制備教學標本等。

  一、杜氏利什曼原蟲無鞭毛體

  取患者的前述組織穿刺物,用適量生理鹽水稀釋后,注射于田鼠(或金黃地鼠)腹腔內,每只鼠注射0.5ml,放籠內飼養(yǎng)。一個月后殺死田鼠,取其肝、脾組織作涂片,染色,鏡檢。轉種時將感染利肝曼原蟲的田鼠解剖,取其肝、脾置于消毒的組織研磨器中或研缽中,加入少量生理鹽水研磨為勻漿后,再加適量生理鹽水稀釋,用消毒注射器吸取稀釋液注射健康田鼠腹腔內,每只鼠注入0.2~0.5ml,繼續(xù)飼養(yǎng)。3~4周后,按前述方法進行檢查。原蟲在動物體內可生存數(shù)月。

  二、剛地弓形蟲

  經穿刺抽取病人的腦脊液0.5~1ml,注射于體重18~25g的健康小白鼠腹腔內。3周后抽取小白鼠腹腔液作涂片檢查(查滋養(yǎng)體)。如為陰性再取肝、脾、腦組織研磨為勻漿,按1:10量加入無菌生理鹽水稀釋,進行第二次接種。如仍為陰性可用同法進行2~3次,再觀察結果。陽性者可作接種傳代,每2周一次,以保種。

  接種小鼠,每只注射0.3~0.5ml的勻漿。感染后每天觀察,即抽取腹腔液涂片,染色后觀察。一般感染第四天可見到弓形蟲滋養(yǎng)體。

  抽取病鼠腹腔液方法,是在其腹部作一切口,用鑷子夾提腹部的皮膚和腹膜,用1ml注射器吸取1ml生理鹽水,迅速注入腹腔,輕揉腹壁,使生理鹽水和腹腔液混勻,然后再抽出腹腔液檢查。

  三、旋毛蟲

  將感染旋毛蟲的小白鼠(或大白鼠)殺死,剝皮,取其肌肉;也可取含有幼蟲的豬肉,剪成米粒大小,取1小塊肉置在載玻片上壓片檢查,以含有100~200個幼蟲囊包量的肌肉,經口喂健康小白鼠,喂前應饑餓小鼠24小時;或將含有幼蟲囊包的肌肉剪碎,置于含有消化液的三角瓶內,一般每1g肌肉加入60ml的消化液,置37~40℃溫箱中,經10~18小時(此間經常搖動燒瓶或攪拌),去掉上層液,然后以水洗沉淀法或離心沉淀法收集幼蟲。以生理鹽水洗滌2~3次,用1ml的注射器和8號針頭吸取100~200條幼蟲,經腹腔注射或喂飼健康小白鼠(或大白鼠)。感染第5周后,可在鼠肌中(以膈肌、腿部肌多見)可找到幼蟲囊包。幼蟲在動物體內可生存3個月或半年。醫(yī)學教育網

  四、血吸蟲

  1.實驗動物一般用18~22g體重的健康小白鼠或2~4kg家兔。

  2.尾蚴逸出將陽性釘螺2~3只放入指管(1×7cm)中、加入去氯水或冷開水至管口,管口蓋以銅絲網,以防釘螺爬出。置25℃孵育4~12小時,尾蚴可陸續(xù)逸出浮于水面。

  3.感染動物將小白鼠或家兔仰臥固定在木板上,剪去腹毛,范圍約5×5cm約1~2張蓋片大?。?,用清水洗凈腹部皮膚。用白金耳沾取液面的尾蚴置于蓋玻片上,在解剖鏡下計算尾蚴數(shù)量。通常感染小白鼠每只50條尾蚴,家兔500~800條即可。將含已計數(shù)尾蚴的蓋片,翻轉覆蓋在動物腹部的去毛處,使其與皮膚接觸,同時在蓋片與皮膚之間滴加少許清水,以保持濕潤;冬季應保持溫度在25℃左右,15~20分鐘后取下蓋片。感染后約40~45天,即能在動物糞便中查到蟲卵。操作中應防止感染,用過器材應消毒。

  五、華支睪吸蟲

  常用實驗動物有貓、犬、豚鼠、大白鼠、兔等。取含有華支睪吸蟲囊蚴的魚肉,用人工消化液消化后收集純凈的囊蚴。將囊蚴拌入飼料喂食或直接從口內插入橡皮管注入胃內。感染囊蚴的數(shù)量,因動物大小而異,以200~400個為宜。感染后一個月,即可自糞便內檢獲蟲卵。

  六、衛(wèi)氏并殖吸蟲

  常用實驗動物有犬、貓。將感染該種吸蟲囊蚴的溪蟹或蝲蛄,放入清水中洗凈后,用研缽或絞肉機搗碎,經篩過濾去除粗殼渣,以沉淀法反復清洗至水清。吸出沉渣放在雙筒解剖鏡下檢查,用滴管吸取囊蚴并計數(shù),將定量囊蚴拌入飼料喂動物。也可將囊蚴放入含有2%膽酸鹽溶液中,置40℃1小時,使后尾蚴脫囊。用無菌生理鹽水洗滌后,給貓或犬進行腹腔注射。幼蟲數(shù)量以100~300個為宜。約2個月后可在糞便中檢出蟲卵。

  注:人工消化液配方

  鹽酸 0.4ml

  胃蛋白酶 25g

  蒸餾水100ml

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