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重組蛋白的高效表達(dá):
重組蛋白在大腸桿菌(E. coli)高效表達(dá)時,往往以不溶的、無活性的蛋白聚集體,即包涵體(inclusion body)的形式存在于細(xì)胞內(nèi)。必須從細(xì)胞內(nèi)分離出包涵體,采用高濃度變性劑(如7.0mol/L鹽酸胍、8.0mol/L脲)溶解包涵體,醫(yī)|學(xué)教育網(wǎng)搜集整理然后除去變性劑或降低變性劑的濃度,使包涵體蛋白得以復(fù)性,最后再用色譜法使目標(biāo)蛋白質(zhì)得到純化。其中包涵體蛋白的復(fù)性和純化是整個過程中的核心。