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結(jié)核桿菌生物學(xué)性狀介紹

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(一)形態(tài)染色

結(jié)核桿菌細(xì)長略彎曲,端極鈍園,大小約1~4×0.4um ,呈單個或分枝狀排列,無莢膜、無鞭毛、無芽胞。在陳舊的病灶和培養(yǎng)物中,形態(tài)常不典型,可呈顆粒狀,串球狀,短棒狀,長絲形等。結(jié)核桿菌一般常用萎~~鈉氏(Ziehl-Neelsen)抗酸性染色法染色,結(jié)核桿菌染成紅色,其他非抗酸性細(xì)菌及細(xì)胞漿質(zhì)等呈藍(lán)色。結(jié)核桿菌的抗酸性取決于胞壁內(nèi)所含分枝菌酸殘基和胞壁固有層的完整性有關(guān)。

(二)培養(yǎng)特性

結(jié)核桿菌為專性需氧菌。營養(yǎng)要求高,在含有蛋黃、馬鈐薯、甘油和天門冬素等的固體培養(yǎng)基上才能生長。最適ph 6.5~6.8 ,最適溫度為37℃,生長緩慢,接種后培養(yǎng)3~4周才出現(xiàn)肉眼可見的菌落。菌落為干燥、堅硬、表面呈顆粒狀、乳酪色或黃色,形似菜花樣。在液體培養(yǎng)內(nèi)呈粗糙皺紋狀菌膜生長,若在液體培養(yǎng)基內(nèi)加入水溶性脂肪酸,如Tween~80,可降低結(jié)核桿菌表面的疏水性,使呈均勻分散生長,此有利于作藥物敏感試驗等。

(三)抵抗力

結(jié)核桿菌對某些理化因子的抵抗力較強(qiáng)。在干痰中存活6~8個月,若粘附于塵埃上,保持傳染性8~10天。在3%HCI或NaOH溶液中能耐受30分鐘,因而常以酸鹼中和處理嚴(yán)重污染的檢材,殺死雜菌和消化粘稠物質(zhì),提高檢出率。但對濕熱、紫外線、酒精的抵抗力弱。在液體中加熱62~63℃15分鐘,直射日光下2~3小時,75%酒精內(nèi)數(shù)分鐘即死亡。

(四)變異性

結(jié)核桿菌對鏈霉素、利福平、異煙肼等抗結(jié)核藥物較易產(chǎn)生耐藥性。耐藥菌菌株常伴隨活力和毒力減弱,如異煙肼耐藥菌株對豚鼠的毒力消失,但對人們?nèi)杂幸欢ǖ闹虏⌒浴?

卡~~介(Calmette-Gerine)二氏將牛型結(jié)核桿菌培養(yǎng)于膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基中,經(jīng)230次傳代,歷時13年,使其毒力發(fā)生變異,成為對人無致病性,而仍保持良好免疫性的菌苗株,稱為卡介菌(Bacilli Calmette-Giierin,BCG)。卡介菌接種人體后,可獲得抗結(jié)核受疫力。

(五)菌體成份與作用

結(jié)核桿菌無內(nèi)毒素,也不產(chǎn)生外毒素和侵襲性酶類,其致病作用主要靠菌體成份,特別是胞壁中所含的大量脂質(zhì)。脂質(zhì)含量與結(jié)核桿菌的毒力呈平行關(guān)系,含量愈高毒力愈強(qiáng)。

1.脂質(zhì)(Lipide):脂質(zhì)占菌體干的20~40%,占胞壁干重的60%,主要是磷脂、脂肪酸和蠟質(zhì),它們大多與蛋白質(zhì)或多糖質(zhì)結(jié)合成復(fù)合物存在。①磷脂能刺激單核細(xì)胞增生,并可抑制蛋白酶的分解作用,使病灶組織溶解不完全,形成干酷樣壞死。②脂肪酸在脂質(zhì)中比重較大,其中6,6~二分枝?!玜,a'~海澡糖(6,6~Dimycocyl~a,a'~D~trehalose)具有破壞細(xì)胞線粒體膜,毒害微粒體酶類,抑制中性粒細(xì)胞游走和吞噬作用,引起慢性肉牙腫。具有該物質(zhì)的結(jié)核桿菌毒株,在液體培養(yǎng)基中能緊密粘成索狀,故稱為索狀因子(cordfactor)。③蠟質(zhì)D為胞壁中的主要成分,是一種肽糖脂(Piptidoglycolipids)與分枝菌酸(My-colic acid)復(fù)合物,能引起遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng),并具有佐劑作用。④硫酸腦苷脂(salfatides)和硫酸多?;T杼牵∕ultiasiylated trehalose salfate)在結(jié)核桿菌毒株胞壁中含有,能抑制吞噬細(xì)胞中的吞噬體與溶酶體融合,使結(jié)核桿菌在細(xì)胞內(nèi)存活。這一類糖脂能結(jié)合中性紅染料。產(chǎn)生中性紅反應(yīng),借此可鑒定結(jié)核桿菌有無毒力。

2.蛋白質(zhì)(Protein):結(jié)核桿菌菌體內(nèi)都含有數(shù)種蛋白質(zhì),其中重要的蛋白質(zhì)是結(jié)核菌素(tuberculin)。結(jié)核茵素與蠟質(zhì)D結(jié)合,能引起較強(qiáng)的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)。其他蛋白質(zhì)可引起機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的抗體,但無保護(hù)作用。

3.多糖質(zhì)(Polysuccharides):多糖質(zhì)常與脂質(zhì)結(jié)合存在于胞壁中,主要有半乳糖,甘露醇、阿拉拍糖等。多糖質(zhì)可使中性粒細(xì)胞增多,引起局部病灶細(xì)胞浸潤。

4.核酸(Nucleic acid):結(jié)核桿菌的核糖體核糖核酸(Ribonucleie acid ribosonic, rRNA)是本菌的免疫原,刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫。

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