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檢測糖化血紅蛋白的方法

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檢測糖化血紅蛋白的方法:

糖化血紅蛋白測定(glycosylated hemoglobin A,GHb)

成人紅細(xì)胞中的血紅蛋白有HbA(占95%~97%以上),HbA2(占2.5%),HbF(占0.2%)。當(dāng)HbA中的部分血紅蛋白被糖基化后,其中由于HbA的β鏈N末端的纈氨酸分子與葡萄糖等己糖分子相結(jié)合而使其在血紅蛋白電泳中成為HbA之前的快泳、HbA1組分,在離子交換柱層析中亦在HbA之前首先被洗脫,糖化Hb可分為HbA1a(其中與1,6-二磷酸果糖結(jié)合的為HbA1a1;與6-磷酸葡萄糖結(jié)合的為HbA1a2),HbA1b(尚無明確定義,包括HbA1b1,HbA1b2,HbA1b3),HbA1e(與葡萄糖結(jié)合)和HbA1d(α鏈和β鏈內(nèi)氨基以及α鏈的N末端基團(tuán)上的烯化血紅蛋白;包括HbA1d1,HbA1d2,HbA1d3)共九種。最重要的是HbA1c.HbA1e的生成量取決于血糖的濃度,正常人約占4%~6%.由于紅細(xì)胞的半壽期是60天,所以GHb的測定可以反映測定前8周左右病人的平均血糖水平。

GHb測定方法很多,兩種最基本的方法是:測定HbA1組分和僅測定HbA1c.高壓液相色譜(HPLC)法可精確分離HbA1各組分;并分別得出HbA1a、HbA1b、HbA1c、HbA1d的百分比,CV3%,是參考方法,其次還有低壓液相色譜(LPLC),目前二者均有高精度的自動化儀器,作為常規(guī)方法用于臨床;硼酸親和柱層析法CV(1%~4.7%),陽離子交換柱層析法CV(2%~16%)醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理,測定的血紅蛋白類型為HbA1.前者在樣本量不大的實(shí)驗(yàn)室仍可使用;后者在分離過程中對pH和溫度的要求極高,HbF是其干擾因素。電泳法CV(4%~10%),分離Hb類型和干擾因素與陽離子交換柱層析法相同;比色法可用于自動生化儀,無血紅蛋白分離步驟,干擾因素小,具特異性和敏感性,但CV較大(4%~18%),且樣品用量大,用濃度單位報(bào)告的方式還未被廣大臨床醫(yī)師接受。

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