利用各種化學物質(zhì)所具有的發(fā)射、吸收或散射光譜譜系的特征，來確定其性質(zhì)、結構或含量的技術，稱為光譜分析技術。

　　分類：光譜分析技術分為發(fā)射光譜分析（熒光分析法和火焰光度法）、吸收光譜分析（可見及紫外光分光光度法、原子吸收分光光度法）和散射光譜分析（比濁法）。

　　（一）可見及紫外分光光度法

　　1.Beer定律：A=k·b·c

　　k一吸光系數(shù)

　　b一光徑，單位：cm.

　　c一溶液濃度，單位：g／L

　　2.摩爾吸光系數(shù)：在公式“A=k·b·c”中，當c=1mol／L，b=1cm時，則常數(shù)k可用ε表示。

　　3.比吸光系數(shù)：在公式“A=k·b·c”中，當c為百分濃度（w／v），b為cm時，則常數(shù)k可用E%表示，稱為比吸光系數(shù)或百分吸光系數(shù)。

　　（二）原子吸收分光光度法

　　原子吸收分光光度法是基于元素所產(chǎn)生的原子蒸氣中待測元素的基態(tài)原子，對所發(fā)射的特征譜線的吸收作用進行定量分析的一種技術，常用的定量方法有：

　　1.標準曲線法：將一系列濃度不同的標準溶液按照一定操作過程分別進行測定，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線。在相同條件下處理待測物質(zhì)并測定其吸光度，即可從標準曲線上找出對應的濃度。由于影響因素較多，每次實驗都要重新制作標準曲線。

　　2.標準加入法：把待測樣本分成體積相同的若干份，分別加入不同量的標準品，然后測定各溶液的吸光度，以吸光度為縱坐標，標準品加入量為橫坐標，繪制標準曲線，用直線外推法使工作曲線延長交橫軸，找出組分的對應濃度。本法的優(yōu)點是能夠更好地消除樣品基質(zhì)效應的影響。

　　3.內(nèi)標法：在系列標準品和未知樣品中加入一定量樣本中不存在的元素（內(nèi)標元素），分別進行測定。以標準品與內(nèi)標元素的比值為縱坐標，標準品濃度為橫坐標繪制標準曲線，再根據(jù)未知樣品與內(nèi)標元素的比值依曲線計算出未知樣品的濃度。本法要求內(nèi)標元素應與待測元素有相近的物理和化學性質(zhì)。只適用于雙通道型原子吸收分光光度計。

　　（三）熒光分析法

　　利用熒光強度進行分析的方法，稱為熒光法。在熒光分析中，待測物質(zhì)分子成為激發(fā)態(tài)時所吸收的光醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理稱為激發(fā)光，處于激發(fā)態(tài)的分子回到基態(tài)時所產(chǎn)生的熒光稱為發(fā)射光。熒光分析法測定的是受光激發(fā)后所發(fā)射的熒光強弱。

　　（四）火焰光度法

　　火焰光度法是利用火焰中激發(fā)態(tài)原子回降至基態(tài)時發(fā)射的光譜強度進行含量分析的方法。樣品中待測元素激發(fā)態(tài)原子的發(fā)射光強度I與該元素濃度C呈正比關系，即I=aC，式中a為常數(shù)，與樣品組成、蒸發(fā)和激發(fā)過程有關。

　　火焰光度法通常采用的定量方法有標準曲線法、標準加入法和內(nèi)標法。

　　（五）透射和散射光譜分析法

　　主要測定光線通過溶液混懸顆粒后的光吸收或光散射程度，常用法為比濁法，又可稱為透射比濁法和散射比濁法。臨床上多用于對抗原或抗體的定量分析。