一、重組DNA技術(shù)的概述

（一）重組DNA技術(shù)相關(guān)的概念

1.DNA克隆

（1）酶學(xué)的方法結(jié)合體外來(lái)源的遺傳物質(zhì)成一具有自我復(fù)制能力的DNA分子，復(fù)制子。

（2）轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞，篩選出含目的基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞。

（3）擴(kuò)增后獲得大量同一DNA分子。

2.工具酶限制性內(nèi)切酶：準(zhǔn)確切割DNA，形成一定大小的DNA片段（2000）。

3.目的基因感興趣的用于擴(kuò)增的基因或DNA系列。

4.基因載體“攜帶”感興趣的外源DNA、無(wú)性繁殖外源DNA或表達(dá)有意義的蛋白質(zhì)所采用的DNA分子。質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA和病毒DNA（2002）。

（二）基因工程的基本原理（2007）

1.獲取目的基因化學(xué)合成、基因組DNA文庫(kù)、cDNA文庫(kù)、聚合酶鏈反應(yīng)。

2.選擇和構(gòu)建克隆載體

3.連接外源基因和DNA黏性末端、平端連接、同聚物加尾、人工接頭連接。醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜|索整理

4.重組DNA導(dǎo)入受菌體感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)染和感染。

5.篩選重組體可通過(guò)直接篩選、免疫學(xué)篩選等進(jìn)行。

6.表達(dá)克隆基因原核體系、真核體系有所不同。

二、基因工程與醫(yī)學(xué)

1.疾病相關(guān)基因的發(fā)現(xiàn)①根據(jù)基因定位克隆一個(gè)基因，確定克隆的基因在分子遺傳病中的作用。②脆性X綜合征及Kallmann綜合征。

2.生物制藥①用于有價(jià)值的蛋白質(zhì)、多肽產(chǎn)品的生產(chǎn)。②構(gòu)建適當(dāng)?shù)谋磉_(dá)體系，表達(dá)有生物活性的蛋白質(zhì)、多肽。

3.基因診斷①在DNA水平分析、鑒定遺傳性疾病所涉及基因的突變。②基本過(guò)程分離、擴(kuò)增待測(cè)DNA片段，用適當(dāng)?shù)姆治鍪侄螀^(qū)分或鑒定DNA的異常。③擴(kuò)增待測(cè)DNA片段最常用方法PCR技術(shù)（2001）。

4.基因治療①向有功能缺陷的細(xì)胞導(dǎo)入具有相應(yīng)功能的外源基因，糾正或補(bǔ)償其基因缺陷。②體細(xì)胞基因治療和性細(xì)胞基因治療。

5.遺傳病的防治可用于產(chǎn)前診斷、攜帶者測(cè)試、癥候前診斷、遺傳病易感性等的檢測(cè)。