基因工程的基本原理是2013年臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試的內(nèi)容之一，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜集整理了相關(guān)資料以便大家更好地復(fù)習(xí)。

完整的基因克隆過(guò)程大致分為六步：

1.（分）目的基因（外源基因）的獲取 獲取途徑：①化學(xué)合成；②酶促合成cDNA；③制備的基因組DNA；④PCR技術(shù)。

2.（載）基因載體的選擇與構(gòu)建 基因載體具有自我復(fù)制能力，或兼有表達(dá)外源基因的能力。如質(zhì)粒DNA、噬菌體DNA和病毒DNA等。

3.（接）外源基因與載體的連接 DNA的體外重組：將外源DNA與載體DNA連接在一起，形成重組DNA分子（嵌合DNA）。連接方式：①黏性末端連接；②平端連接；③人工接頭連接。

4.（轉(zhuǎn)）重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞 將重組DNA分子（含目的DNA）導(dǎo)入宿主細(xì)胞。使之隨受體細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，重組DNA分子得以復(fù)制、擴(kuò)增。

5.（篩）重組體的篩選 篩選出帶有目的基因的菌落或噬菌斑。

6.（表）克隆基因的表達(dá) 克隆基因表達(dá)為所需的蛋白產(chǎn)物。