蛋白質的分離純化是臨床助理醫(yī)師考試需要了解的內容，醫(yī)學教育網搜集整理了相關知識點，以便廣大考生參考學習。

1.透析：利用透析袋把大分子蛋白質與小分子化合物分開的方法。

2.超濾法：應用正壓或離心力使蛋白質溶液透過有一定截留分子量的超濾膜的方法。

3.丙酮沉淀：0-4℃低溫；丙酮的體積10倍于被沉淀蛋白質；蛋白質沉淀后應迅速分離。

4.鹽析：硫酸銨、硫酸鈉或氯化鈉等中性鹽放入蛋白質溶液中，破壞水化膜并中和表面電荷，導致蛋白質膠體的穩(wěn)定因素去除而沉淀。

5.免疫沉淀法：利用特異抗體識別相應的抗原蛋白，形成抗原抗體復合物，從蛋白質混合溶液中分離獲得抗原蛋白的方法。

6.電泳：蛋白質在高于或低于其等電點的溶液中，受到電場力的作用向正極或負極泳動。

（1）SDS-PAGE電泳：加入負電荷較多的SDS（十二烷基磺酸鈉），導致蛋白質分子間的電荷差異消失，此時蛋白質在電場中的泳動速率只和蛋白質顆粒大小有關，用于蛋白質分子量的測定。

（2）等電聚焦電泳：在電場中形成一個連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度，電泳時被分離的蛋白質泳動至其等電點相等的pH值區(qū)域時，凈電荷為零不再受電場力移動，該法用于根據蛋白質等電點的差異進行分離。

（3）層析：待分離蛋白質溶液（流動相）經過一個固態(tài)物質（固定相）時，根據溶液中待分離的蛋白質顆粒大小、電荷多少及親和力等，使待分離的蛋白質在兩相中反復分配，并以不同速度流經固定相而達到分離蛋白質的目的。

7.陰離子交換層析：負電量小的蛋白質首先被洗脫

8.凝膠過濾：分子量大的蛋白質最先洗脫

9.超速離心：既可分離純化蛋白質也可測定蛋白質的分子量；

對于球形蛋白質而言，沉降系數S大體上和分子量成正比關系

S（未知）/S（標準）＝｛Mr（未知）/Mr（標準）｝^2/3