方法名稱(chēng)：

護(hù)肝片-五味子乙素測(cè)定-高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定護(hù)肝片中五味子乙素的含量。

本方法適用于中成藥護(hù)肝片。

方法原理：

供試品加正己烷超聲提取，過(guò)濾，低溫蒸干，殘?jiān)蛹状级ㄈ荩酶咝б合嗌V儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)254nm處檢測(cè)五味子乙素的吸收值，計(jì)算其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 五味子乙素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)

儀器設(shè)備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱：十八烷基硅膠鍵合硅膠為填充劑(ODS柱，5μm，4.6mm×250mm)，理論板數(shù)按五味子乙素計(jì)應(yīng)符合規(guī)定。

1.3紫外吸收檢測(cè)器

1.4超聲發(fā)生器

2 色譜條件

2.1流動(dòng)相：甲醇+水=72+28，流速:1.2ml/min

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備：

1. 對(duì)照品溶液的制備

取五味子乙素對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加甲醇制成每毫升含0.05mg的溶液，即得。

2. 供試品溶液的制備

取本品20片，除去糖衣，精密稱(chēng)定，研細(xì)，取2.5g，精密稱(chēng)定，置錐形瓶中，加正己烷適量，超聲提取2次，每次30min，過(guò)濾，合并2次濾液，低溫蒸干，殘?jiān)蛹状嘉崾谷芙?，移?5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，紫外吸收檢測(cè)器，于254nm處測(cè)定五味子乙素的吸收值，計(jì)算出其含量。

注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱(chēng)取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

參考文獻(xiàn)：

高宇源，馬梅芳，HPLC快速測(cè)定護(hù)肝片中五味子乙素的含量，山東中醫(yī)雜志，2003，22（1）：40-42。