HIV抗體一般在人感染后幾周逐漸出現(xiàn),可延續(xù)至終生[15]，血清學(xué)試驗(yàn)分為初篩和確認(rèn)試驗(yàn)。最常用的初篩試驗(yàn)和確認(rèn)試驗(yàn)分別是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和免疫印跡試驗(yàn)(WB)。常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法：酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)(WestBlot)、間接免疫熒光法(IFA)?？焖贆z測方法：明膠顆粒凝集試驗(yàn)、斑點(diǎn)免疫結(jié)合試驗(yàn)、P24抗原的檢測、分子生物學(xué)方法、RT?PCR檢測法、熒光實(shí)時(shí)PCR檢測技術(shù)、支鏈DNA（bDNA）、連接酶酶促鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(LCR)、核酸序列依賴性擴(kuò)增(NASBA)、轉(zhuǎn)錄介導(dǎo)的擴(kuò)增(TMA)

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)

ELISA法的基本原理是免疫反應(yīng)物通過化學(xué)或免疫學(xué)的方法形成酶結(jié)合物，酶結(jié)合物能與待檢樣品中相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合成為免疫復(fù)合物,然后加入酶底物,經(jīng)酶的催化或水解作用,無色底物產(chǎn)生顏色,用肉眼、分光光度計(jì)觀察結(jié)果。初篩用的HIV ELISA試劑目前已經(jīng)發(fā)展到第四代檢測試劑。第一代試劑主要以病毒裂解物或部分純化的病毒抗原包被反應(yīng)板,以檢測血清中的抗體。由于包被的抗原不很純,假陽性率較高。第二代試劑使用基因工程方法得到的重組抗原和合成肽包被反應(yīng)板，由于純化抗原的使用,特異性有了很大提高。第三代試劑使用雙抗原夾心法檢測抗體,進(jìn)一步提高了敏感性。第四代試劑則在第三代的基礎(chǔ)上進(jìn)一步增加了P24抗原的檢測,把HIV抗原和抗P24的抗體同時(shí)包被反應(yīng)板,可同時(shí)檢測血清中的HIV抗體和P24抗原。

免疫印跡試驗(yàn)

免疫印跡試驗(yàn)主要用于確認(rèn)試驗(yàn)，基本原理是HIV全病毒抗原經(jīng)過SDS?PAGE電泳,將分子量大小不等的蛋白帶分離開來,然后再把這些已經(jīng)分離的不同蛋白帶電轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上。將此膜切割成條狀,每一條硝酸纖維素膜上均含有經(jīng)電泳分離過的HIV病毒抗原。將待檢血清樣品用稀釋液稀釋成1/100,再把它直接加到硝酸纖維素膜上,恒溫震蕩,使其充分接觸反應(yīng),血清中若含有抗HIV抗體,就會(huì)與膜條上的抗原帶相結(jié)合。加入抗人IgG酶結(jié)合物和底物后,即可使有反應(yīng)的抗原?抗體結(jié)合帶呈現(xiàn)紫褐色,根據(jù)出現(xiàn)條帶情況判定結(jié)果。有報(bào)告說，免疫印跡試驗(yàn)的特異性不是很好, 有大約2%的假陽性率，但免疫印跡試驗(yàn)依然是目前最常用的HIV確認(rèn)試驗(yàn)。

免疫熒光試驗(yàn)(IFA) 基本原理為應(yīng)用H?9或HUT?78培養(yǎng)細(xì)胞作為載體,用HIV感染細(xì)胞,該細(xì)胞內(nèi)就會(huì)含有HIV抗原,將HIV感染的淋巴細(xì)胞涂于玻片上,固定，制備為抗原片,加入待檢血清，待檢血清中的抗 HIV抗體與抗原結(jié)合后,再與熒光素標(biāo)記的抗人Ig結(jié)合,在熒光顯微鏡下可見到細(xì)胞內(nèi)有黃綠色熒光。

明膠顆粒凝集試驗(yàn)(PA)

PA的基本過程是先將樣品稀釋,然后分別加入經(jīng)抗原致敏的和未致敏的明膠顆粒,混勻后保溫(一般為室溫)。當(dāng)血清中有HIV抗體存在時(shí),經(jīng)抗原致敏的明膠顆粒與抗體發(fā)生抗原抗體反應(yīng),根據(jù)明膠顆粒在孔中的凝集情況判讀結(jié)果。PA操作簡便,無需特殊儀器設(shè)備,適合對(duì)少量標(biāo)本的檢測。

斑點(diǎn)印跡試驗(yàn)(或免疫層析/或滲濾)

斑點(diǎn)印跡試驗(yàn)一般采用硝酸纖維素膜作固相載體, 用HIV抗原包被于固相載體,加入待測標(biāo)本(可為血清、血漿、尿液和其他體液),一定溫度反應(yīng)后洗去未結(jié)合于固相載體上的標(biāo)本,包被抗原和被檢血清中抗體結(jié)合,用膠體金(或膠體硒)代替底物連接在葡萄球菌蛋白A上,金標(biāo)記蛋白A具有與人Ig結(jié)合的能力,因而可與被捕獲的HIV抗體結(jié)合。若樣品中有HIV抗體,則薄膜上就會(huì)產(chǎn)生一桔紅色斑點(diǎn)(或線條),一般3～10 min出結(jié)果,特異性較好, 較為適宜于偏遠(yuǎn)地區(qū)臨床用血檢測,但不適于城市地區(qū)的獻(xiàn)血員篩查。