方法名稱：

桂附地黃丸－馬錢苷的測(cè)定－高效液相色譜法

應(yīng)用范圍：

該方法采用高效液相色譜法測(cè)定桂附地黃丸中馬錢苷的含量。

該方法適用于中成藥桂附地黃丸。

方法原理：

該品經(jīng)甲醇超聲處理后，搖勻，濾過，續(xù)濾液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)236nm處檢測(cè)馬錢苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

試劑：

1. 甲醇

2. 乙腈

3. 0.05%磷酸溶液

儀器設(shè)備：

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按馬錢苷計(jì)算應(yīng)不低于4000。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：乙腈為流動(dòng)相A，0.05%磷酸溶液為流動(dòng)相B

時(shí)間（分鐘） 流動(dòng)相A（%） 流動(dòng)相B（%）

0~20         11           89

20~30         90         10

30~40          11         89

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：236nm

2.3柱溫：30℃

試樣制備：

1. 稱取供試品

取該品水蜜丸，研碎，取約1g，精密稱定；或取小蜜丸或重量差異項(xiàng)下的大蜜丸，剪碎，混勻，取約1g，精密稱定，為供試品。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取馬錢苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含20mg溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液25mL（剩余的續(xù)濾液備用），蒸干，殘?jiān)眉状既芙猓⑥D(zhuǎn)移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

操作步驟：

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器于波長(zhǎng)236nm處測(cè)定馬錢苷（C17H26O10）的峰面積，計(jì)算出其含量。

參考文獻(xiàn)：

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，一部，p556。