(1)腺苷照高效液相色譜法(中國藥典2000年版一部附錄Ⅵ D) 試驗。 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑:甲醇 -0.05mol/L磷酸氫二鈉溶液(17:83)為流動相,檢測波長為260nm。理論板數(shù)按腺苷峰計算應不低于2000。 對照品溶液的制備 精密稱取減壓干燥至恒重的腺苷對照品10mg,置100ml 量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取10ml,置100ml量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得(每1ml含腺苷10μg)。 供試品溶液的制備 取本品10粒,傾出內容物,精密稱定,研細,取0.5g,精密稱定,置50ml量瓶中,加水適量,超聲處理30分鐘,放冷,加水稀釋至刻度,搖勻,濾過,取濾液,即得。 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl,注入液相色譜儀,測定,即得。 本品每粒含腺苷(C10H13N5O4)不得少于0.25mg。
(2)多糖 對照品溶液的制備 精密稱取105℃干燥至恒重的無水葡萄糖對照品,加水制成每1ml含無水葡萄糖0.1mg的溶液,作為對照品溶液。 標準曲線的制備 精密吸取對照品溶液0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml置試管中,加水至2ml,再加6%苯酚溶液1ml,搖勻,迅速加入硫酸5ml,搖勻,置沸水浴中加熱15分鐘,同時作空白對照,冷卻后照分光光度法(中國藥典2000 年版一部附錄Ⅴ B),在490nm的波長處測定吸收度,以吸收度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。 測定法 取本品10粒,傾出內容物,精密稱定,研細,取1g,精密稱定,置圓底燒瓶中,精密加0.1%十二烷基磺酸鈉溶液30ml,精密稱定,置水浴中回流2小時,急速冷卻,再稱定重量,以水補足減失的重量(精確至0.01g),搖勻,立即離心(3500轉/分),取上清液,精密量取10ml,加入3倍量乙醇冷藏24小時,離心,棄去上清液,沉淀用少量乙醇洗滌,加水適量使溶解,容器用少量水洗滌,溶液與洗液合并,置100ml量瓶中,加水至刻度,精密量取5ml,置50ml量瓶中,加水至刻度,精密量取溶液2ml置試管中,加入6%苯酚溶液1ml,搖勻,加入硫酸5ml,搖勻,置沸水浴中加熱15分鐘,同時作空白對照,冷卻后照分光光度法(中國藥典2000年版一部附錄Ⅴ B)在490nm波長處測定吸收度。從標準曲線上讀出供試品溶液中葡萄糖的量,計算,即得。 本品每粒含多糖以葡萄糖(C6H12O6)計,不得少于25mg。