分離方法：

目前胚胎干細(xì)胞來源主要是胚泡內(nèi)細(xì)胞群和生殖嵴中的原始生殖細(xì)胞

免疫學(xué)方法：干細(xì)胞表面有許多特殊標(biāo)記，利用這些標(biāo)記，采用熒光細(xì)胞分離器從單細(xì)胞懸液中的分離純化干細(xì)胞。

免疫外科方法：該方法基本原理是利用囊胚腔對抗體的不通透性，通過抗體、補(bǔ)體結(jié)合對細(xì)胞的毒性殺傷作用，去除滋養(yǎng)層細(xì)胞，保留CIM進(jìn)行培養(yǎng)。

組織培養(yǎng)：將4-6天的胚胎取出培養(yǎng)，滋養(yǎng)層在培養(yǎng)皿底部平鋪生長，而CIM形成卵圓柱裝結(jié)構(gòu)，在顯微鏡下用玻璃針挑出這種柱狀結(jié)構(gòu)，消化傳代

顯微外科學(xué)法：利用顯微鏡直接將CIM從胚泡中吸出進(jìn)行培養(yǎng)。

鑒定方法：

1形態(tài)學(xué)檢測：體積小、核大、核質(zhì)比高，一個或多個突起的核仁，常染色質(zhì)，胞質(zhì)少、結(jié)構(gòu)簡單。

體外培養(yǎng)：細(xì)胞排列緊密，集落狀生長。堿性磷酸酶染色，細(xì)胞呈棕紅色，周圍成纖維細(xì)胞淡黃色。細(xì)胞克隆與周圍界限明顯，細(xì)胞克隆間界限不清、形態(tài)多樣，多數(shù)呈島狀或巢狀。

2堿性磷酸酶活性的檢測——染色后呈深藍(lán)紫色

3體內(nèi)分化實(shí)驗(yàn)：畸胎瘤

4體外分化實(shí)驗(yàn)：囊狀簡單胚體或類胚體，常見多種類型細(xì)胞混雜在一起

5核型分析法：二倍體正常核型

6OCT活性檢測： 多能性基因標(biāo)志。OCT抗血清和間接免疫熒光法檢測OCT基因表達(dá)產(chǎn)物

ES細(xì)胞應(yīng)用：

（1）ES細(xì)胞的應(yīng)用前景

1.動物克隆及人類治療性克隆

2.在轉(zhuǎn)基因動物中的應(yīng)用

3.制備嵌合體動物

（2）ES細(xì)胞研究面臨的難題

1.體外培養(yǎng)ES細(xì)胞需篩選適宜的培養(yǎng)條件，平衡增殖和分化之間的矛盾

2.高度未分化，具形成畸胎瘤的可能性

3.真正用于器官克隆與移植仍需技術(shù)上的突破

4.倫理學(xué)