斑點(diǎn)金免疫滲濾試驗(yàn)原理介紹:
以硝酸纖維素膜為載體醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)|搜集整理,利用微孔濾膜的可濾過(guò)性,使抗原抗體反應(yīng)和洗滌在一特殊的滲濾裝置上以液體滲濾過(guò)膜的方式迅速完成。斑點(diǎn)免疫滲濾試驗(yàn)最初是從斑點(diǎn)ELISA基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)建立的,應(yīng)用的結(jié)合物是酶標(biāo)記的,稱(chēng)為斑點(diǎn)酶免疫滲濾試驗(yàn)。90年代初發(fā)展了以膠體金為標(biāo)記物的斑點(diǎn)免疫滲濾試驗(yàn)),又名滴金免疫測(cè)定法(簡(jiǎn)稱(chēng)滴金法)。在滴金法中不需酶對(duì)底物的反應(yīng),更加簡(jiǎn)便、快速,在臨床檢驗(yàn)中應(yīng)用日漸廣泛。
以雙抗體夾心法為例。在硝酸纖維素膜的膜片中央滴加純化的抗體,為膜所吸附。當(dāng)?shù)渭釉谀ど系臉?biāo)本液體滲濾過(guò)膜時(shí),標(biāo)本中含抗原被膜上抗體捕獲,其余無(wú)關(guān)蛋白等沒(méi)濾出膜片。其后加入的膠體金標(biāo)記也在滲濾中與已結(jié)合在膜上的抗原相結(jié)合。因膠體金本身呈紅色,陽(yáng)性反應(yīng)即在膜中央顯示紅色斑點(diǎn)。