血細(xì)胞染色——堿性磷酸酶染色法，為了幫助更多考生了解，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)為大家搜集整理如下：

（1）原理（偶氮偶聯(lián)法）：血細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶在pH9.4～9.6的條件下將基質(zhì)液中的α-磷酸萘酚鈉水解，產(chǎn)生α-萘酚與重氮鹽偶聯(lián)形成不溶性灰黑色沉淀，定位于酶活性所在之處。

（2）結(jié)果判斷：陽(yáng)性結(jié)果為胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)灰褐色至深黑色顆粒狀或片狀沉淀：

①（-）無(wú)灰褐色沉淀，為0分。

②（+）胞質(zhì)出現(xiàn)灰褐色沉淀，為1分。

③（++）胞質(zhì)深褐色沉淀，為2分。

④（+++）胞質(zhì)中已基本充滿棕黑色顆粒狀沉淀，但密度較低，為3分。

⑤（++++）胞質(zhì)全被深黑色團(tuán)塊沉淀所充滿，密度高，甚至遮蓋胞核，為4分。

該染色結(jié)果計(jì)算比較特殊，算積分值。

1-1分 2-1分 3-2分 4-3分 5-4分 6-4分

（3）正常血細(xì)胞的染色反應(yīng)

1）堿性磷酸酶主要存在于成熟中性粒細(xì)胞，除巨噬細(xì)胞可呈陽(yáng)性反應(yīng)外，其他血細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。

2）成熟中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶積分值的計(jì)算：在油鏡下，計(jì)數(shù)100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞（包括中性分葉核粒細(xì)胞和中性桿狀核粒細(xì)胞）。分別記錄其分級(jí)情況，全部陽(yáng)性反應(yīng)的細(xì)胞之和即為陽(yáng)性率，將所有陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞均以“+”級(jí)表示后，計(jì)算其總積分值。

例：某患者計(jì)數(shù)100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞，其結(jié)果如下：

（4）參考值：成熟中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶（NAP）的積分值為30～130。由于各實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)條件不同，正常值也有差異，應(yīng)建立本實(shí)驗(yàn)室的正常值。這里的正常值僅供參考。

（5）臨床意義

1）生理變化：①年齡變化：新生兒NAP活性增高，以后下降。兒童期各年齡大致相似，成年期較兒童期活性減低，老年期更低。②應(yīng)激狀態(tài)下的變化：緊張、恐懼、激烈運(yùn)動(dòng)等NAP活性可增高。③月經(jīng)周期中的變化：經(jīng)前期增高，行經(jīng)后降低，經(jīng)后期恢復(fù)。④妊娠期的變化：妊娠2～3個(gè)月的NAP積分值輕度增高，以后逐月增高，分娩時(shí)達(dá)高峰，產(chǎn)后則恢復(fù)正常。

2）病理性變化：

①感染：細(xì)菌性感染時(shí)NAP積分值增高。在細(xì)菌性感染中球菌性感染較桿菌性感染為高；在球菌性感染中，急性較慢性為高。病毒性感染時(shí)，NAP積分值一般無(wú)明顯變化。因此本染色法有時(shí)可幫助鑒別細(xì)菌性感染和病毒性感染。

②血液病：慢性粒細(xì)胞白血病的NAP積分值明顯減低，常為“0”，緩解時(shí)NAP積分值上升到正常。類白血病反應(yīng)時(shí)的NAP積分值明顯增高，中性桿狀核粒細(xì)胞的堿性磷酸酶活性增強(qiáng)，甚至中性晚幼粒細(xì)胞也呈陽(yáng)性反應(yīng)。因此本法常用來(lái)鑒別慢性粒細(xì)胞白血病（簡(jiǎn)稱慢粒）和類白血病反應(yīng)及觀察慢粒療效的指標(biāo)之一。

急性粒細(xì)胞白血病時(shí)NAP積分值減低，急性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)NAP積分值一般增高，因此本法可作為鑒別急粒和急性淋巴細(xì)胞白血病（簡(jiǎn)稱急淋）的方法之一；急性單核細(xì)胞白血病時(shí)NAP積分值一般減低，有時(shí)可正常；粒細(xì)胞白血病合并細(xì)菌性感染時(shí)NAP積分值可增高，但不如單純細(xì)菌性感染增高的明顯。

再生障礙性貧血的NAP積分值增高，當(dāng)病情好轉(zhuǎn)時(shí)，NAP積分值可下降，完全緩解時(shí)NAP活性可恢復(fù)到正常，因此本法對(duì)再生障礙性貧血（簡(jiǎn)稱再障）的診斷、療效觀察和估計(jì)病情均有一定意義；陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿的NAP積分值減低，因此本法可作為鑒別陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿和再生障礙性貧血的方法之一。

原發(fā)性紅細(xì)胞增多癥的NAP積分值升高，而繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥的NAP積分值無(wú)明顯變化，因此本法可用來(lái)鑒別真性紅細(xì)胞增多癥和繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥；骨髓增生異常綜合征的NAP積分值減低。

③其他：紅白血病的NAP積分值減低，慢性淋巴細(xì)胞白血病、骨髓纖維化、原發(fā)性血小板增多癥和紅血病等疾病的NAP積分值可增高；NAP積分值減低，也可見(jiàn)于鐮形細(xì)胞性貧血、嚴(yán)重型嗜酸性粒細(xì)胞增多癥、家族性低磷酸酶血癥。

3）其他：應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、雌激素和ACTH后NAP積分值增高。

酯酶的分類

特異性酯酶：specific esterase，SE。

非特異性酯酶：nonspecific esterase，NSE。

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