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紅細胞計數(shù)操作的方法

2019-07-15 09:28 醫(yī)學教育網(wǎng)
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(1)計數(shù)和計算:在2ml紅細胞稀釋液中加血10μl,混勻后,充入計數(shù)池,靜置3~5min后,在高倍鏡下,計數(shù)中央大方格內(nèi)4角和正中5個中方格內(nèi)的紅細胞數(shù)。計數(shù)時需遵循一定方向逐格進行,以免重復或遺漏,對壓線細胞采用數(shù)左不數(shù)右、數(shù)上不數(shù)下的原則。

計算公式為:

紅細胞/L=N×25/5×10×106×200=N×1010= N/100×1012(N:5個中方格內(nèi)的紅細胞數(shù))。

N×25/5:表示5個中方格換算成1個大方格。

×10:1個大方格容積為0.1μl,換算成1μl。

×200:血液的實際稀釋倍數(shù)。

×106:由1μl換算成1L。

(2)清潔:應保證計數(shù)板和蓋玻片清潔。操作時,勿接觸計數(shù)板表面,以防污染。使用后,依次用95%乙醇、蒸餾水棉球、清潔綢布擦凈。

(3)充池:需一次完成充池,如充池過少、過多或有氣泡、繼續(xù)充液,應重新操作,充池后不能移動蓋玻片。紅細胞在計數(shù)池中若分布不均,每個中方格間相差超過20個應重新充池,兩次紅細胞計數(shù)相差不得超過5%.

(4)計數(shù)板:改良牛鮑計數(shù)板每年要鑒定1次,以免影響計數(shù)結(jié)果的準確性。

(5)白細胞影響:通常白細胞總數(shù)較少,僅相當于紅細胞的1/500~1/1000,對結(jié)果影響很小,可以忽略不計。但白細胞過高者(WBC>100×10 9/L),紅細胞計數(shù)結(jié)果應進行校正。

方法有兩種:一是直接將患者紅細胞數(shù)減去白細胞數(shù),二是在高倍鏡下觀察勿將白細胞計入,白細胞體積常比紅細胞略大,中央無凹陷,細胞核隱約可見,無黃綠色折光。

(6)紅細胞稀釋液:傳統(tǒng)稀釋液(Hayem液)由NaCl(氯化鈉,調(diào)節(jié)滲透壓)、Na 2S0 4.10H2O(結(jié)晶硫酸鈉,提高比密防止細胞粘連)、HgCl2.(氯化高汞,防腐)和蒸餾水組成。枸櫞酸鈉稀釋液由枸櫞酸鈉(抗凝和維持滲透壓)、甲醛(防腐和固定紅細胞)、氯化鈉(調(diào)節(jié)滲透壓)和蒸餾水組成。普通生理鹽水或加1%甲醛生理鹽水。

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