凝血儀的檢測(cè),方法有哪些?
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1.凝固法
也稱為生物學(xué)法,將凝血因子或激活劑加入到血漿中,使血漿發(fā)生凝固,凝血儀記錄血漿凝固過(guò)程中一系列的變化(如光、電、機(jī)械運(yùn)動(dòng)等),并將這些變化的信號(hào)轉(zhuǎn)變成數(shù)據(jù),計(jì)算機(jī)處理分析后得出檢測(cè)結(jié)果。
目前在凝血儀上使用的凝固法大致分為三類:光學(xué)法、黏度法和電流法。
(1)光學(xué)法:待測(cè)血漿在凝固過(guò)程中,纖維蛋白原逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白,其理學(xué)性質(zhì)也發(fā)生改變,透射光和散射光強(qiáng)度發(fā)生改變,凝血儀根據(jù)這種光學(xué)性質(zhì)的改變來(lái)判斷凝固終點(diǎn)。光學(xué)法可分為透射比濁法和散射比濁法。
(2)黏度法:在待測(cè)血漿中加入小磁珠,利用變化的磁場(chǎng)使小磁珠產(chǎn)生運(yùn)動(dòng),隨血漿的凝固,血液黏度增加,小磁珠的運(yùn)動(dòng)逐漸減弱,儀器根據(jù)小磁珠運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的變化來(lái)確定凝固終點(diǎn)。
(3)電流法:該法將待測(cè)血漿作為電路的一部分,由于纖維蛋白具有導(dǎo)電性,可利用電流的斷與否來(lái)判斷纖維蛋白的形成與否,即判斷凝固終點(diǎn)。
2.發(fā)色底物法
該法主要是利用測(cè)定產(chǎn)色物質(zhì)的吸光度變化來(lái)推算所測(cè)定物質(zhì)的含量。
基本原理為:首先人工合成含某種活性酶裂解點(diǎn)的化合物,此化合物上連接有產(chǎn)色物質(zhì)(如對(duì)硝基苯胺,PNA),待測(cè)血漿中含有活性酶或往樣品中加入活性酶,化合物中的產(chǎn)色物質(zhì)可被裂解下來(lái),使待測(cè)樣本出現(xiàn)顏色變化,根據(jù)此顏色變化可推算出被檢物質(zhì)的含量。
一般產(chǎn)色物質(zhì)選用PNA,游離的PNA呈黃色,測(cè)定波長(zhǎng)為405nm,而連接PNA的化合物為無(wú)色。
利用該法檢測(cè)的物質(zhì)有ATⅢ、PLG、PC、PS等。
3.免疫學(xué)法
利用抗原抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)來(lái)對(duì)被測(cè)物質(zhì)進(jìn)行定量。
自動(dòng)凝血儀多采用免疫比濁法進(jìn)行測(cè)定,又分為透射免疫比濁法和散射免疫比濁法。
利用該法檢測(cè)的物質(zhì)有D-二聚體等。
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