抗血清有哪些鑒定方法?
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1.抗體特異性的鑒定
常用雙向免疫擴(kuò)散法。
(1)粗抗原及純抗原之間皆有一條沉淀線,且兩者互相融合,則已產(chǎn)生單價特異性抗體;
(2)若純化抗原出現(xiàn)一條,而粗抗原出現(xiàn)多條線,且一條沉淀線與純抗原沉淀線相連接,需去除雜抗;
(3)若不出現(xiàn)沉淀線,表示免疫失敗。
2.抗體效價的測定
顆粒性抗原采用凝集試驗(yàn),可溶性抗原采用雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)(棋盤滴定)、ELISA等方法。
3.抗體純度的鑒定
采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)、雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)、免疫電泳等。
若只出現(xiàn)一條蛋白電泳區(qū)帶說明抗體純化已達(dá)到要求。
4.抗體親和力的鑒定
以親和常數(shù)表示。
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