結(jié)核分枝桿菌的生物學(xué)性狀是什么?
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結(jié)核分枝桿菌的生物學(xué)性狀:
形態(tài)與染色
結(jié)核分枝桿菌為細(xì)長略帶彎曲的桿菌,大小1~4X0.4μm。牛分枝桿菌則比較粗短。分枝桿菌屬的細(xì)菌細(xì)胞壁脂質(zhì)含量較高,約占干重的60%,大量分枝菌酸(mycolic acid)包圍在肽聚糖層的外面,可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼(Ziehl- Neelsen)抗酸染色法,以5% 石炭酸復(fù)紅加溫染色后可以染上,但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍(lán)復(fù)染,則分枝桿菌呈紅色,而其他細(xì)菌和背景中的物質(zhì)為藍(lán)色。本菌無芽孢、無鞭毛。
結(jié)核分枝桿菌在體內(nèi)外經(jīng)青霉素、環(huán)絲氨酸或溶菌酶誘導(dǎo)可影響細(xì)胞壁中肽聚糖的合成,異煙肼影響分枝菌酸的合成,巨噬細(xì)胞吞噬結(jié)核分枝桿菌后溶菌酶的作用可破壞肽聚糖,均可導(dǎo)致其變?yōu)長型細(xì)菌,呈顆粒狀或絲狀。異煙肼影響分枝菌酸的合成,可變?yōu)榭顾崛旧幮浴?/span>
這種形態(tài)多形染色多變在肺內(nèi)外結(jié)核感染標(biāo)本中常能見到。臨床結(jié)核性冷膿瘍和痰標(biāo)本中甚至還可見有非抗酸性革蘭陽性顆粒,過去稱為Much顆粒。該顆粒在體內(nèi)或細(xì)胞培養(yǎng)中能返回為抗酸性桿菌,故亦為L型細(xì)菌。
培養(yǎng)特性
專性需氧。最適溫度為37℃,低于30℃不生長。結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁的脂質(zhì)含量較高,影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,故生長緩慢。
結(jié)核菌在含氧40%~50%并有5%~10%CO2和溫度為36℃±5℃,合適PH值為6.8~7.2的條件下生長旺盛。在一般培養(yǎng)基中每分裂1代需時18~24小時,營養(yǎng)豐富時只需5小時。
初次分離需要營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。常用的有羅氏(Lowenstein-Jensen)固體培養(yǎng)基,內(nèi)含蛋黃、甘油、馬鈴薯、無機鹽和孔雀綠等。
孔雀綠可抑制雜菌生長,便于分離和長期培養(yǎng)。蛋黃含脂質(zhì)生長因子,能刺激生長。根據(jù)接種菌多少,一般2~4周可見菌落生長。
菌落呈顆粒、結(jié)節(jié)或花菜狀,乳白色或米黃色,不透明。在液體培養(yǎng)基中可能由于接觸營養(yǎng)面大,細(xì)菌生長較為迅速。一般1~2周即可生長。臨床標(biāo)本檢查液體培養(yǎng)比固體培養(yǎng)的陽性率高數(shù)倍。
生化反應(yīng)
結(jié)核分枝桿菌不發(fā)酵糖類。與牛分枝桿菌的區(qū)別在于結(jié)核分枝桿菌可合成煙酸和還原硝酸鹽,而牛分枝桿菌不能。熱觸酶試驗對區(qū)別結(jié)核分枝桿菌與非結(jié)核分枝桿菌有重要意義。結(jié)核分枝桿菌大多數(shù)觸酶試驗陽性,而熱觸酶試驗陰性; 非結(jié)核分枝桿菌則大多數(shù)兩種試驗均陽性。熱觸酶試驗檢查方法是將濃的細(xì)菌懸液置68℃水浴加溫20分鐘,然后再加H2O2。觀察是否產(chǎn)生氣泡,有氣泡者為陽性。
抵抗力
結(jié)核分枝桿菌對乙醇敏感,在70%乙醇中2分鐘死亡。此外,菌體脂質(zhì)可防止菌體水分丟失,故對干燥的抵抗力特別強。粘附在塵埃上保持傳染性8~10d,在干燥痰內(nèi)可存活6~8個月。結(jié)核分枝桿菌對濕熱敏感,在液體中加熱62~63℃ 15分鐘或煮沸即被殺死。結(jié)核分枝桿菌對紫外線敏感。直接日光照射數(shù)小時可被殺死,可用于結(jié)核患者衣服、書籍等的消毒。
結(jié)核分枝桿菌對酸(3% HCl或6% H2SO4)或堿(4% NaOH)有抵抗力,15分鐘不受影響??稍诜蛛x培養(yǎng)時用于處理有雜菌污染的標(biāo)本和消化標(biāo)本中的粘稠物質(zhì)。結(jié)核分枝桿菌對1:13 000孔雀綠有抵抗力,加在培養(yǎng)基中可抑制雜菌生長。
變異性
結(jié)核分枝桿菌可發(fā)生形態(tài)、菌落、毒力、免疫原性和耐藥性等變異??ń槊纾˙CG)就是Calmette和Guerin (1908)將牛結(jié)核分枝桿菌在含甘油、膽汁、馬鈴薯的培養(yǎng)基中經(jīng)13年230次傳代而獲得的減毒活疫苗株,現(xiàn)廣泛用于預(yù)防接種。
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