雙位點一步法與間接法區(qū)別有什么?
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間接法是利用酶標(biāo)記的抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。
雙位點一步法是在雙抗體夾心法測定抗原時,如應(yīng)用針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標(biāo)抗體,在測定時可使標(biāo)本的加入和酶標(biāo)抗體的加入兩步并作一步。
在一步法測定中,應(yīng)注意鉤狀效應(yīng),類同于沉淀反應(yīng)中抗原過剩的后帶現(xiàn)象。當(dāng)標(biāo)本中待測抗原濃度相當(dāng)高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成夾心復(fù)合物,所得結(jié)果將低于實際含量。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時甚至可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
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