檢驗士：《答疑周刊》2019年第24期

2019-01-25 17:04 來源：

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檢驗士：《答疑周刊》2019年第24期：

《微生物學(xué)及檢驗》重要考點（一）

1.微生物的特點：①多數(shù)以獨立生活的單細胞和細胞群體的形式存在；②新陳代謝能力旺盛，生長繁殖速度快；③變異快，適應(yīng)能力強；④種類多、分布廣、數(shù)量大；⑤個體微小。

2.微生物的分類：

①原核細胞型微生物：僅有原始核，無核膜、無核仁，染色體僅為單個裸露的DNA分子，不進行有絲分裂，缺乏完整的細胞器。屬于這類微生物的有細菌、放線菌、螺旋體、支原體、衣原體、立克次體。

②真核細胞型微生物：細胞核分化程度較高，有典型的核結(jié)構(gòu)（有核膜、核仁、多個染色體，由DNA和組蛋白組成），通過有絲分裂進行繁殖。胞漿內(nèi)有多種完整的細胞器。屬于這類微生物的有真菌和原蟲。

③非細胞型微生物：結(jié)構(gòu)最簡單，體積最微小，能通過細菌濾器，無細胞結(jié)構(gòu)，由單一核酸（DNA或RNA）和蛋白質(zhì)外殼組成，無產(chǎn)生能量的酶系統(tǒng)。必須寄生在活的易感細胞內(nèi)生長繁殖。這類微生物有病毒、亞病毒和朊粒。

3.細菌形體微小，通常以微米為測量單位。菌齡與環(huán)境等因素對菌體大小有影響。

4.細菌的基本結(jié)構(gòu)：細胞壁、細菌膜、細胞質(zhì)和核質(zhì)等。

細菌的特殊結(jié)構(gòu)：莢膜、鞭毛、菌毛和芽胞。

5.鞭毛是細菌的運動器官，細菌能否運動可用于鑒定。

6.細菌L型：生長緩慢，營養(yǎng)要求高，對滲透壓敏感，普通培養(yǎng)基上不能生長，培養(yǎng)時必須用高滲的含血清的培養(yǎng)基。細菌L型在該培養(yǎng)基中能緩慢生長，可形成三種類型的菌落：①油煎蛋樣菌落；②顆粒型菌落；③絲狀菌落。

7.細菌個體的生長繁殖：細菌一般是以二分裂方式進行無性繁殖，個別細菌如結(jié)核分枝桿菌可以通過分枝方式繁殖。大多數(shù)細菌繁殖的速度為每20～30min分裂一次，稱為一代，而結(jié)核分枝桿菌則需要18～20h才能分裂一次。

8.細菌的生長曲線分為4個時期：①遲緩期；②對數(shù)期；③穩(wěn)定期；④衰亡期。

9.細菌合成代謝產(chǎn)物有：①熱原質(zhì)；②毒素和侵襲性酶；③色素；④抗生素；⑤細菌素；⑥維生素。

10.S-R變異：指新從患者分離的沙門菌常為光滑型，經(jīng)人工培養(yǎng)后菌落呈現(xiàn)粗糙型。常伴有抗原、毒力、某些生化特性的改變。

11.毒力變異：有毒力減弱和增強兩種?？ń槊缡且恢甓玖p弱而保留抗原性的變異株，預(yù)防接種對人不致病，卻可使人獲得免疫力。

12.基因物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和重組：

（1）轉(zhuǎn)化：是受體菌直接攝取供體菌提供的游離DNA片段整合重組，使受體菌的性狀發(fā)生變異的過程。

（2）轉(zhuǎn)導(dǎo)：是以溫和噬菌體為媒介，將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌內(nèi)，導(dǎo)致受體菌基因改變的過程。

（3）接合：是受體菌和供體菌直接接觸，供體菌通過性菌毛將所帶有的F質(zhì)?；蝾愃七z傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移至受體菌的過程。

（4）溶原性轉(zhuǎn)換：是噬菌體的DNA與細菌染色體重組，使宿主菌遺傳結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而引起的遺傳型變異。

（5）原生質(zhì)體融合：兩種經(jīng)過處理失去細胞壁的原生質(zhì)體混合可發(fā)生融合，融合后的雙倍體細胞可發(fā)生細菌染色體間的重組。

13.細菌的分類等級：界、門、綱、目、科、屬、種。

14.鱟試驗陽性表明有革蘭染色陰性菌或內(nèi)毒素血癥，也可用于生物制品或注射液的內(nèi)毒素污染檢測。

15.暗視野顯微鏡多用于檢查不染色的活細菌和螺旋體的形態(tài)及運動觀察。

16.相差顯微鏡主要用于檢查不染色活細菌的形態(tài)及某些內(nèi)部結(jié)構(gòu)。

17.細菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脫色）→（復(fù)染）。

18.常用的堿性染料有堿性復(fù)紅、結(jié)晶紫、亞甲藍等。

19.常用的酸性染料有伊紅、剛果紅等。

20.電離后顯色離子帶正電荷，易與帶負電荷的被染物結(jié)合。由于細菌的等電點在pH2～5之間，在堿性、中性、弱酸性的環(huán)境中細菌均帶負電荷，易與帶正電荷的染料結(jié)合而著色。

21.蛋白胨是制備培養(yǎng)基時最常用的成分之一，提供細菌生長繁殖所需要的氮源。

22.培養(yǎng)基種類：

（1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基：含有基礎(chǔ)生長所需的基本營養(yǎng)成分，最常用的是肉浸液，俗稱肉湯，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨?；A(chǔ)培養(yǎng)基廣泛用于細菌的增菌、檢驗，也是制備其他培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分。

（2）營養(yǎng)培養(yǎng)基：在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中可加入葡萄糖、血液、生長因子等特殊成分，供營養(yǎng)要求較高的細菌和需要特殊生長因子的細菌生長。最常用的是血瓊脂平板、巧克力血平板等。

（3）鑒別培養(yǎng)基：利用細菌分解糖類和蛋白質(zhì)的能力及其代謝產(chǎn)物的不同，在培養(yǎng)基中加入特定的作用底物和指示劑，觀察細菌生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物，通過指示劑的反應(yīng)不同來鑒別細菌。例如糖發(fā)酵管、克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）、伊紅-亞甲藍瓊脂和動力-吲哚-尿素（MIU）培養(yǎng)基等。

（4）選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入抑制劑，去抑制標(biāo)本中的雜菌生長，有助于所選擇的細菌種類的生長。例如培養(yǎng)腸道致病菌的SS瓊脂，其中的膽鹽能抑制革蘭陽性菌，枸櫞酸鈉和煌綠能抑制大腸埃希菌，因而使致病的沙門菌、志賀菌容易分離到。

（5）特殊培養(yǎng)基：包括厭氧培養(yǎng)基和細菌L型培養(yǎng)基等。前者是培養(yǎng)專性厭氧菌的培養(yǎng)基，除含營養(yǎng)成分外，還加入還原劑以降低培養(yǎng)基的氧化還原電勢，如皰肉培養(yǎng)基、巰基乙醇酸鈉培養(yǎng)基等。后者是針對細胞壁缺損的細菌L型，由于胞內(nèi)滲透壓較高，故培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。

23.細菌的接種與分離技術(shù)：

（1）常用的平板劃線分離法有以下兩種：①連續(xù)劃線分離法：此法主要用于雜菌不多的標(biāo)本。②分區(qū)劃線分離法：本法適用于雜菌量較多的標(biāo)本。

（2）斜面接種法：該法主要用于單個菌落的純培養(yǎng)、保存菌種或觀察細菌的某些特性。

（3）液體接種法：多用于一些液體生化試驗管的接種。

（4）穿刺接種法：此法主要用于半固體培養(yǎng)基、明膠及雙糖管的接種。

（5）傾注平板法：測定牛乳、飲水和尿液等標(biāo)本細菌數(shù)時常用此方法。

（6）涂布接種法：常用于紙片法藥物敏感性測定，也可用于被檢標(biāo)本中的細菌計數(shù)。