檢驗(yàn)主管:《答疑周刊》2020年第46期
《臨床免疫學(xué)與檢驗(yàn)》重要考點(diǎn)(二)
1.鄰苯二胺(OPD)被認(rèn)為是HRP最為敏感的色原底物之一。
2.四甲基聯(lián)苯胺(TMB):TMB是一種優(yōu)于OPD的新型HRP色原底物。已成為目前ELISA中應(yīng)用最廣泛的底物。
3.吖啶酯是目前常用的直接標(biāo)記發(fā)光劑。
4.免疫組化最常用的制片方法有冷凍和石蠟切片。首選的制片方法是冷凍切片。
5.外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離:Ficoll分離液可作為常規(guī)的淋巴細(xì)胞分離液,主要用于分離外周血中單個(gè)核細(xì)胞,是一種單次密度梯度離心分離法,其分布由上到下依次為:稀釋的血漿層、單個(gè)核細(xì)胞層、粒細(xì)胞層和紅細(xì)胞層。
6.T細(xì)胞表面標(biāo)志:CD3+CD4+CD8-輔助性T細(xì)胞;CD3+CD4-CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞;CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞。
7.T細(xì)胞表面主要的CD抗原:
①CD2表達(dá)于全部人T細(xì)胞和NK細(xì)胞表面,因其能與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合,又稱為綿羊紅細(xì)胞受體。
②CD3是一種多鏈的糖蛋白,表達(dá)于全部T細(xì)胞表面,是T細(xì)胞的表面標(biāo)志,是TCR-CD3復(fù)合物的重要組成部分。
③CD4/CD8:CD4和CD8分子分別表達(dá)于外周血不同的T細(xì)胞亞群表面,是區(qū)分T細(xì)胞亞群的重要標(biāo)志。表達(dá)CD4的主要是輔助性T細(xì)胞,表達(dá)CD8的主要是細(xì)胞毒性T細(xì)胞。
8.膜免疫球蛋白(mIg)又稱為BCR,表達(dá)于所有成熟的B細(xì)胞和大多數(shù)B細(xì)胞瘤的細(xì)胞表面,屬于免疫球蛋白超家族原型,是B細(xì)胞最具特性的表面標(biāo)志。
9.NK細(xì)胞的表面標(biāo)志:目前NK標(biāo)志以CD3-、CD16+、CD56+為公認(rèn)。
10.T細(xì)胞功能檢測(cè):T細(xì)胞增殖試驗(yàn)、T細(xì)胞分泌功能測(cè)定、T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)和體內(nèi)試驗(yàn)(特異性抗原皮膚試驗(yàn)和PHA皮膚試驗(yàn))。
11.B細(xì)胞功能檢測(cè):B細(xì)胞增殖試驗(yàn)和溶血空斑試驗(yàn)。
12.溶血空斑試驗(yàn):每一個(gè)空斑中央含一個(gè)抗體形成細(xì)胞,空斑數(shù)目即為抗體形成細(xì)胞數(shù)??瞻叽笮”硎究贵w形成細(xì)胞產(chǎn)生抗體的多少。
13.中性粒細(xì)胞功能檢測(cè):趨化功能檢測(cè)、吞噬和殺菌功能測(cè)定(NBT還原試驗(yàn))。
14.巨噬細(xì)胞功能檢測(cè):炭粒廓清試驗(yàn)、吞噬功能檢測(cè)、巨噬細(xì)胞溶酶體酶的測(cè)定、細(xì)胞毒作用測(cè)定和巨噬細(xì)胞促凝血活性測(cè)定。
15.前向散射光(FS):信號(hào)的強(qiáng)弱與細(xì)胞的體積成正比,因此可以說(shuō)FS是用于檢測(cè)細(xì)胞或其他粒子物體的表面屬性。
16.側(cè)向散射光(SS):SS信號(hào)的強(qiáng)弱與細(xì)胞或其他顆粒形狀及粒度成正比。SS用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)屬性,可獲得有關(guān)細(xì)胞內(nèi)超微結(jié)構(gòu)和顆粒性質(zhì)的參數(shù)。
17.時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定中多用Eu3+和Tb3+為標(biāo)志物,其中Eu3+最為常用。
18.超敏反應(yīng)的分型:Ⅰ型超敏反應(yīng),即速發(fā)型超敏反應(yīng);Ⅱ型超敏反應(yīng),即細(xì)胞毒型或細(xì)胞溶解型超敏反應(yīng);Ⅲ型超敏反應(yīng),即免疫復(fù)合物型或血管炎型超敏反應(yīng);IV型超敏反應(yīng),即遲發(fā)型超敏反應(yīng)。
19.Ⅰ型超敏反應(yīng)的主要特征有:①超敏反應(yīng)發(fā)生快,消退快;②常引起生理功能紊亂,較少發(fā)生嚴(yán)重的組織細(xì)胞損傷;③由特異性IgE型抗體介導(dǎo),無(wú)補(bǔ)體參與;④具有明顯的個(gè)體差異和遺傳背景。
20.常見Ⅰ型超敏反應(yīng)性疾?。孩偎幬镞^敏性休克(青霉素引發(fā)的過敏性休克最為常見);②血清過敏性休克;③呼吸道過敏反應(yīng);④消化道過敏反應(yīng);⑤皮膚過敏反應(yīng)(可由藥物、食物、油漆、腸道寄生蟲或冷熱刺激等引起。病變以皮疹為主,特點(diǎn)是劇烈瘙癢。)
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