糖化血紅蛋白測(cè)定中的常用檢測(cè)方法是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主管技師考試可能涉及到的知識(shí)點(diǎn)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理了相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，供考生參考。

離子交換色譜法（HPLC、LPLC）：基于電荷差異進(jìn)行分析。葡萄糖與血紅蛋白（Hb）的β鏈N末端纈氨酸（Val）結(jié)合降低了等電點(diǎn)，導(dǎo)致糖化Hb帶的正電荷比未糖化Hb的少，與樹脂的附著力小，可以分別用不同的離子濃度的緩沖液在不同的時(shí)間將Hb從陽(yáng)離子交換柱中洗脫下來(lái)，再根據(jù)每個(gè)峰值下的面積來(lái)計(jì)算HbA1c占總Hb的比例。

精密度高，有些產(chǎn)品CV可以小于1%

非特異性問(wèn)題存在，有些產(chǎn)品仍會(huì)受變異Hb 、氨基甲酰化和乙?；疕b影響

可采用高通量的高效液相色譜（HPLC）和低壓系統(tǒng)（LPLC）方法

美國(guó)糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃（NGSP）的參考方法

電泳法（Elec）：研制于上世紀(jì)80年代，與離子交換層析法一樣也是基于糖化和非糖化Hb所帶的電荷不同進(jìn)行分離。該方法操作簡(jiǎn)易，不受溫度、pH影響，在當(dāng)時(shí)相對(duì)其他方法來(lái)說(shuō)精密度較高，但是需成批樣本分析，分析時(shí)間較長(zhǎng)，臨床上現(xiàn)已較少使用。

親和色譜法（HPLC-af chr）：基于結(jié)構(gòu)不同進(jìn)行分析。利用對(duì)m-氨苯基硼酸依賴的糖化血紅蛋白1，2-順式二醇基團(tuán)和固定的硼酸陰離子的特殊反應(yīng)而設(shè)計(jì)的。與Hbα和β鏈的纈氨酸（Val）和賴氨酸（？-Lys）連接的葡萄糖均會(huì)與硼酸結(jié)合形成可逆的復(fù)合物，未糖化Hb先被洗脫后，再用山梨醇分離復(fù)合物，并將全部糖化Hb洗脫出來(lái)。

檢測(cè)結(jié)果是“總”糖化Hb，通過(guò)校準(zhǔn)其結(jié)果與HPLC有良好的相關(guān)性

不受溫度、尿毒癥、HbF或Schiff base的干擾

室內(nèi)精密度較高，實(shí)驗(yàn)室間的結(jié)果存在差異

免疫法（Im tur）：抗原抗體反應(yīng)原理。單克隆抗體技術(shù)的運(yùn)用使該方法有了快速發(fā)展，最早是英國(guó)Dako公司研制出識(shí)別葡萄糖附著在Hb的β鏈N末端8個(gè)氨基酸抗原位點(diǎn)的單克隆抗體，用酶免疫原理（EIA）進(jìn)行檢測(cè)。

具有較好的精密度、與其他方法有較好的相關(guān)性

可以在自動(dòng)生化儀上用比濁法進(jìn)行定量測(cè)定

抗原與IFCC一級(jí)參考物質(zhì)β鏈N末端6個(gè)氨基酸肽端相似

如果用6個(gè)氨基酸的為抗原，當(dāng)Hb發(fā)生第6位氨基酸變異[HbS（β6glu→val）和HbC（β6glu→lys）]時(shí)將不會(huì)被識(shí)別，可導(dǎo)致廠家間的檢測(cè)結(jié)果存在著偏倚

各廠家產(chǎn)品的單抗針對(duì)的抗原決定簇不同、親和力不同等因素也會(huì)影響結(jié)果的可比性

酶法（En）：近幾年才推出在自動(dòng)生化儀上測(cè)定的生化反應(yīng)方法。其原理是在蛋白酶的作用下，切斷HbA1c的？鏈N末端的糖化二肽，糖化二肽在果糖基肽氧化酶的作用下生成過(guò)氧化氫，在過(guò)氧化物酶的存在下與顯色劑產(chǎn)生顯色反應(yīng)，通過(guò)測(cè)定吸光度求出HbA1c的百分濃度。該方法精密度好，同HPLC和免疫法均有較好的相關(guān)性。

快速檢驗(yàn)（POCT：Mic chr、Flu im）