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常規(guī)免疫檢測技術(shù)-檢驗主管技師

常規(guī)免疫檢測技術(shù)-檢驗主管技師

(一)皮內(nèi)試驗

宿主在病原體刺激后,體內(nèi)產(chǎn)生親細(xì)胞性抗體(IgE和IgG4)。當(dāng)其與相應(yīng)抗原結(jié)合后,肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒,釋放生物活性物質(zhì),引起注射抗原的局部皮膚出現(xiàn)皮丘及紅暈,以此便可判斷體內(nèi)是否某有種特異性抗體存在。

(二)免疫擴散和免疫電泳

1.免疫擴散于一定條件下,抗原與抗體在瓊脂凝膠中相遇,在二者含量比例合適時形成肉眼可見的白色沉淀。本法有兩種類型:①單相免疫擴散:將一定量的抗體混入瓊脂凝膠 中,使抗原溶液在凝膠中擴散而形成沉淀環(huán),其大小與抗原量成正比;②雙相免疫擴散:將抗原與抗體分別置于凝膠板的相對位置,二者可自由擴散并在中間形成沉 淀線。用雙相免疫擴散法既可用已知抗原檢測未知抗體,也可用已知抗體檢測未知抗原。

2.免疫電泳是將免疫擴散與蛋白質(zhì)凝膠電泳相結(jié)合的一項技術(shù)。事先將抗原在凝膠板中電泳,之后在凝膠槽中加入相應(yīng)抗體,抗原和抗體雙相擴散后,在比例合適的位置,產(chǎn)生肉眼可見的弧形沉淀線。

(三)間接紅細(xì)胞凝集試驗

以紅細(xì)胞作為可溶性抗原的載體并使之致敏。致敏的紅細(xì)胞與特異性抗體結(jié)合而產(chǎn)生凝集,抗原與抗體間的特異性反應(yīng)即由此而顯現(xiàn)。常用的紅細(xì)胞為綿羊或O型人紅細(xì)胞。

(四)間接熒光抗體試驗

vvv本 法用熒光素(異硫氰基熒光素)標(biāo)記第二抗體,可以進行多種特異性抗原抗體反應(yīng),即可檢測抗原又可檢測抗體。本法具有較高的敏感性、特異性和重現(xiàn)性等優(yōu)點, 除可用于寄生蟲病的快速診斷,流行病學(xué)調(diào)查和疫情監(jiān)測外,還可用于組織切片中抗原定位以及在細(xì)胞和亞細(xì)胞水平觀察和鑒定抗原、抗體和免疫復(fù)合物醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)`搜集整理。

(五)對流免疫電流試驗

對流免疫電泳試驗是以瓊脂或瓊脂糖凝膠為基質(zhì)的一種快速,敏感的電泳技術(shù)。既可用已知抗原檢測抗體,又可用已知抗體檢測抗原。反應(yīng)結(jié)果可信度高,適用范圍廣。以本法為基礎(chǔ)改進的技術(shù)有酶標(biāo)記抗原對流免疫電泳和放射對流免疫電泳自顯影等技術(shù)。二者克服了電泳技術(shù)本身不夠靈敏的弱點。

(六)酶聯(lián)免疫吸附試驗

vvv酶聯(lián)免疫吸附試驗原理是將抗原或抗體與底物(酶)結(jié)合,使其保持免疫反應(yīng)和酶的活性。把標(biāo)記的抗原或抗體與包被于固相載體上的配體結(jié)合,再使之與相應(yīng)的無色底物作用而顯示顏色,根據(jù)顯色深淺程度目測或用酶標(biāo)儀測定OD值判定結(jié)果。

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