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檢驗(yàn)科質(zhì)控的影響因素之實(shí)驗(yàn)室方面

  1、嚴(yán)格執(zhí)行病人、化驗(yàn)單及標(biāo)本收集器皿的核對(duì)制度,保證無(wú)差錯(cuò)。

  2、對(duì)檢驗(yàn)申請(qǐng)單要認(rèn)真審核。包括檢驗(yàn)項(xiàng)目、診斷以及標(biāo)本采集時(shí)間及采集者的簽名等,24h尿液收集要有真實(shí)時(shí)間記錄及總量記錄。

  3、收集符合要求的標(biāo)本:簽收人員應(yīng)逐一檢查標(biāo)本的質(zhì)量,避免血少或嚴(yán)重污染等,對(duì)不合格、但可以接受的樣本,簽收人員要記錄標(biāo)本的缺陷,對(duì)于諸如空管等不可接納的樣本,簽收人員應(yīng)拒絕接受,同時(shí)注明拒收原因,并通知臨床重新采集標(biāo)本。

  4、建立標(biāo)本保管制度:隨著標(biāo)本放置時(shí)間的延長(zhǎng),有些成分的變化較大,對(duì)不能及時(shí)檢驗(yàn)的標(biāo)本,經(jīng)正確處理后放冰箱(或冰凍)保存;對(duì)發(fā)出報(bào)告的常規(guī)標(biāo)本一般保留1-2天,以備復(fù)查。

  5、血清或(血漿)標(biāo)本的處理方法檢驗(yàn)科收到臨床標(biāo)本后,應(yīng)盡快低速離心分離血清或血漿進(jìn)行測(cè)定。45℃水浴10分鐘,再3000r/min離心5分鐘,即可使LDH、K等顯著升高。對(duì)血液標(biāo)本外觀觀察是判斷標(biāo)本質(zhì)量的最直觀的方法,外觀異常有溶血、黃疸、脂血等情形,是引起測(cè)定誤差最常見(jiàn)的因素。

 ?。?)標(biāo)本的離心離心分離血清應(yīng)選擇相對(duì)離心力(RCF)為1000g~1200g,離心時(shí)間為5~10分鐘。增加相對(duì)離心力或增加離心時(shí)間,都易引起溶血。

 ?。?)溶血標(biāo)本的處理溶血可導(dǎo)致RBC內(nèi)多種成分的釋出,引起對(duì)測(cè)定方法的干擾,Hb≥0.2g/L,肉眼可見(jiàn)溶血。

  ①間接干擾:Hb的釋出,可引起間接的干擾,因Hb在波長(zhǎng)為431nm和555nm處有光吸收,若被測(cè)物選用與之相近波長(zhǎng)作比色分析時(shí),可導(dǎo)致假性增高。處理方法:輕度溶血,同時(shí)作血清空白;嚴(yán)重溶血,重留樣本。

 ?、谥苯痈蓴_:RBC內(nèi)含量高的血液化學(xué)成分溶血后,這些化學(xué)成分在血清中濃度就會(huì)增高,避免用溶血標(biāo)本測(cè)定在RBC內(nèi)含物高的化學(xué)成分。如鉀、ALP、AST、Bil、CK、LD、ACP等。

  (3)乳糜標(biāo)本的處理高脂血癥的病人往往可導(dǎo)致乳糜血,為了不影響檢測(cè),應(yīng)對(duì)乳糜血進(jìn)行澄清。具體方法如下:血清和(或)血漿與氟利昂以1:1在玻璃試管中混合。氟利昂在血漿和(或)血清下,180℃顛倒試管3min,使充分混合。然后3000g離心6min.上清液為澄清的血清,中層含沉淀的脂蛋白,下層為多余的氟利昂,澄清過(guò)程可重復(fù)多次而不影響酶的活性和底物。

 ?。?)膽紅素(黃疸)標(biāo)本的處理膽紅素的顏色對(duì)反應(yīng)結(jié)果為黃色和紅色化合物的比色分析有正向干擾,可用樣品空白或動(dòng)力學(xué)和雙試劑消除。另外,膽紅素不穩(wěn)定,在堿性環(huán)境或強(qiáng)光線照射下,轉(zhuǎn)變?yōu)槟懢G素、膽褐素而褪色,如用堿性苦味酸法測(cè)定肌酐,黃疸標(biāo)本常常會(huì)出現(xiàn)負(fù)數(shù)。另外膽紅素還有還原性,對(duì)Trinder反應(yīng)有負(fù)干擾,如氧化酶法測(cè)定葡萄糖、膽固醇、甘油三脂、尿酸等,可通過(guò)進(jìn)行干擾試驗(yàn)消除恒定誤差。

  6、標(biāo)本保存因分析不能立即進(jìn)行或分析后需要重新檢測(cè),樣本需要保存。如果是后一種目的,標(biāo)本可根據(jù)下列原則保存而不會(huì)產(chǎn)生明顯影響。

  短期保存:全血細(xì)胞計(jì)數(shù)(不包括分類)所用EDTA抗凝血可在室溫下保存24h.分類計(jì)數(shù)、涂片應(yīng)在標(biāo)本收集后5h內(nèi)完成。如果用血細(xì)胞分析儀對(duì)血細(xì)胞分類,根據(jù)所用的不同的分析系統(tǒng),標(biāo)本保存都不應(yīng)超過(guò)8h。用于APTT與PT的血小板枸櫞酸抗凝血漿,可在室溫下保存8h,應(yīng)在3h內(nèi)測(cè)定凝血因子活力,而且血漿必須始終在4~8℃保存。檢測(cè)酶或底物的血清或肝素抗凝血漿可在4~8℃保存一周,但酶對(duì)LD和ACP例外,因LD活力對(duì)冷不穩(wěn)定,ACP只在酸性條件穩(wěn)定,底物TG例外,因?yàn)閮?nèi)源性脂肪酶可分解TG為甘油。血漿蛋白:包括免疫球蛋白和特異性抗體,4~8℃可保存一周。如果不超過(guò)25℃,標(biāo)本普通的郵寄是可以的。

  長(zhǎng)期保存:長(zhǎng)期保存,要求保存溫度低于-20℃,溶解必須緩慢,在4~8℃過(guò)夜或在水浴中不斷攪動(dòng)。通常在溶解中形成濃度梯度,所以分析前必須充分混勻,必須注意試管底部的沉積物,它們可能由冷球蛋白、異型蛋白或冷沉淀纖維蛋白原引起,如果必要,這些沉淀通過(guò)加熱重新溶解。

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