熒光分析法介紹:
某些物質(zhì)受紫外光或可見光照射激發(fā)后,能發(fā)出比激發(fā)光波長更長的熒光。利用物質(zhì)的熒光光譜進行定性、定量分析的方法稱為熒光分析法。
基本原理:
物質(zhì)的分子吸收紫外光或可見光后,由電子基態(tài)能級躍遷至激發(fā)態(tài)能級。處于激發(fā)態(tài)的分子不穩(wěn)定,通過各種方式失去能量,返回基態(tài)。若分子首先通過碰撞和系統(tǒng)內(nèi)轉(zhuǎn)換等方式失去部分能量,下降至電子第一激發(fā)態(tài)的最低振動能級,然后再發(fā)射一定波長的光返回電子基態(tài)的任一振動能級,則被發(fā)射的光稱為熒光。顯然,熒光的能量小于激發(fā)光能量,波長則長于激發(fā)光。熒光的平均壽命很短,除去激發(fā)光源,熒光立即熄滅。醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)收集整理
記錄某一物質(zhì)溶液在不同波長激發(fā)光照射時的發(fā)射光強度,可得到該物質(zhì)的熒光激發(fā)光譜;使激發(fā)光的波長和強度保持不變,記錄熒光物質(zhì)溶液在不同熒光波長時的發(fā)射光強度,就得到了該物質(zhì)的熒光發(fā)射光譜。不同結(jié)構(gòu)的化合物產(chǎn)生不同的熒光激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜,據(jù)此可對物質(zhì)進行定性分析。
當激發(fā)光的波長、強度,測定用溶劑、溫度等條件一定時,物質(zhì)在低濃度范圍內(nèi)的熒光強度與溶液中該物質(zhì)的濃度成正比。這就是熒光分析法用于物質(zhì)定量分析的依據(jù)。