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由于中藥藥理學(xué)研究對(duì)象是中藥單味藥及其復(fù)方的藥理,無論是單味藥或復(fù)方,其所含的化學(xué)成分都很復(fù)雜。中藥藥理研究不能脫離中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)作用,不能忽略病與證的結(jié)合問題,從而決定中藥藥理學(xué)方法有其區(qū)別于一般藥理學(xué)方法的特殊性。
?。?)中藥活性物質(zhì)和藥理活性的篩選方法:分為廣篩法和定向法兩種。廣篩法是設(shè)定明確的實(shí)驗(yàn)指標(biāo),從大量的藥物、有效部位或單體中篩選出具有某種特殊作用的藥物。醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理如從大量的中藥成分中篩選出對(duì)白血病具有抑制作用的中藥青黛(有效成分靛玉紅);從對(duì)瘧原蟲鼠瘧的抑制篩選出具有抗瘧作用的中藥青蒿(有效成分青蒿素)等,均采用了廣篩法。定向篩選法是以中藥及其復(fù)方的功效、主治為線索,設(shè)計(jì)藥理實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證藥理作用。比較成功的例子如從理氣止痛中藥玄胡索中篩選出具有鎮(zhèn)痛作用的活性成分玄胡索乙素,從活血化瘀藥中研制治療冠心病的中藥復(fù)方等。
(2)綜合集成的中藥藥性理論研究方法:中藥藥性理論是數(shù)千年來指導(dǎo)臨床實(shí)踐的基本理論,其內(nèi)涵包括四氣五味、歸經(jīng)、升降浮沉、毒性、炮制、配伍宜忌、組方原理等多個(gè)方面,又與中醫(yī)基礎(chǔ)理論緊密相聯(lián),將中藥藥性理論現(xiàn)代化、科學(xué)化、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化,事關(guān)中藥現(xiàn)代化、國際化的大局。但中藥成分的復(fù)雜性、中藥藥性理論的模糊性,決定了單靠一兩個(gè)學(xué)科很難揭示中藥藥性理論的規(guī)律。如從中藥基原而言,植物、動(dòng)物來源的中藥,親緣關(guān)系愈近,活性成分愈相似,功效愈相似,而研究其中的規(guī)律就涉及到植物分類學(xué)、動(dòng)物分類學(xué)、植物分子系統(tǒng)學(xué)、植物化學(xué)、中藥藥理學(xué)等學(xué)科;同一植物、動(dòng)物基原,不同的藥用部位、不同的采集時(shí)間、醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理不同的炮制方法,其所含活性成分的質(zhì)和量有差異,藥性、功效主治也有差異,而研究其間的相互關(guān)系又需要集成藥用植物栽培、養(yǎng)殖技術(shù)、中藥炮制學(xué)的理論和方法。中藥進(jìn)入人體,是一個(gè)復(fù)雜的過程,涉及到個(gè)體體質(zhì)的差異性。經(jīng)口用藥又有一個(gè)吸收、分布、代謝、排泄的過程,研究相關(guān)專題與血清藥化學(xué)、血清藥理學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)、人類基因組學(xué)、疾病代謝組學(xué)有很大關(guān)系,因此,研究中藥藥性理論需要綜合多學(xué)科的知識(shí)和方法,穩(wěn)步推進(jìn),逐一突破,是一個(gè)長期的艱巨的系統(tǒng)工程。
?。?)中藥血清藥理學(xué)方法:中藥是一個(gè)含有多種成分的復(fù)合體,一般多使用粗制劑,經(jīng)口服用,經(jīng)過吸收、分布、代謝而發(fā)揮作用。針對(duì)這樣的實(shí)際狀況,日本學(xué)者在1984年提出“中藥血清藥理學(xué)”方法。它是指將中藥或中藥復(fù)方經(jīng)口給動(dòng)物灌服一定時(shí)間后采集動(dòng)物血液、分離血清,用此含有藥物成分的血清進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn),與用中藥粗制劑直接進(jìn)行的體外實(shí)驗(yàn)相比,既保持了體外實(shí)驗(yàn)條件可控性強(qiáng)、藥物效應(yīng)易于檢測、可深入揭示藥物作用機(jī)理的優(yōu)點(diǎn),又能夠防止中藥粗制劑本身的理化性質(zhì)對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾,反映中藥在胃腸道消化吸收、再經(jīng)生物轉(zhuǎn)化、最后產(chǎn)生藥理效應(yīng)的真實(shí)過程,并代表了藥物在體內(nèi)產(chǎn)生作用的真正有效成分。目前在中藥藥理實(shí)驗(yàn)研究中得到了推廣應(yīng)用。
(4)病證動(dòng)物模型方法:某些藥物,多在病理情況下才產(chǎn)生作用,如五苓散對(duì)健康人、正常小鼠、家兔均無利尿作用,但對(duì)有水代謝障礙者有利尿作用。白虎加人參湯能降低血氧嘧啶性糖尿病動(dòng)物血糖,但對(duì)正常動(dòng)物血糖無影響。所以要建立與臨床一致的病理模型進(jìn)行藥理試驗(yàn)。
①疾病模型:分為自發(fā)性疾病動(dòng)物模型和誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型。前者是指對(duì)沒有經(jīng)過任何有意識(shí)的人工處理而在自然情況下發(fā)生基因突變、染色體畸變的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,醫(yī)`學(xué)教育網(wǎng)搜集整理通過定向培育而保留下來的疾病模型。誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型是指通過使用物理、化學(xué)及生物學(xué)等方法,造成動(dòng)物整體、器官或組織發(fā)生一定程度的損害,得到某些類似于人類疾病的動(dòng)物模型。
②證候模型:中醫(yī)證候是疾病發(fā)展到某一階段時(shí)對(duì)病因、病位、病性及正邪對(duì)比情況的病理概括。證候動(dòng)物模型是指在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下,采用生物學(xué)等方法使動(dòng)物出現(xiàn)中醫(yī)證候的表現(xiàn)。如用大黃飼喂小鼠使其出現(xiàn)類似人類的“脾虛證”,用夾尾法制作大鼠肝郁證模型,用糖皮質(zhì)激素喂飼制作大鼠或小鼠陰虛模型,用利血平皮下或肌肉注射制作小鼠陽虛模型,用氨水刺激小鼠制作肺虛痰組動(dòng)物模型等,均是近年比較成功的證候模型。
③病證結(jié)合模型:參合中醫(yī)的發(fā)病學(xué)說和西醫(yī)的致病原理復(fù)制動(dòng)物模型。如用飲食不節(jié)、勞倦過度等因素造成大白鼠脾虛證模型,在此基礎(chǔ)上加用氯化鋁復(fù)制的Alzheimer型癡呆疾病模型。將家兔在禁水禁食18小時(shí)后,以速尿二度利尿脫水,造成“陰津虧虛”狀態(tài),然后注射大腸桿菌內(nèi)毒素以致“熱盛”,從而完成溫病陰虛熱盛模型的制作。采用中劑量鏈脲佐菌素腹腔內(nèi)注射及肥甘飲食持續(xù)喂養(yǎng)10周的方法,復(fù)制實(shí)驗(yàn)性NID?鄄DM大鼠模型(消渴)等,均為比較成功的病證結(jié)合模型制作方法。
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