腦脊液常規(guī)檢測主要包括蛋白定性、細(xì)胞計數(shù)及定量測定蛋白質(zhì)、葡萄糖和氯離子,在醫(yī)院檢驗(yàn)科中是檢測量比較少的項目,目前還沒有專門的檢測儀器,檢測方法通常還是手工方法。但尿分析儀、生化分析儀、尿沉渣分析儀及血細(xì)胞分析儀發(fā)展較快,自動化程度日益增強(qiáng),本文就使用這些儀器對腦脊液常規(guī)進(jìn)行檢測做可行性分析。
1 用尿分析儀測定腦脊液蛋白質(zhì)
在《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第2版(以下簡稱《規(guī)程》)中用潘氏試驗(yàn)做腦脊液常規(guī)中的蛋白定性檢查,其原理是腦脊液中蛋白與苯酚結(jié)合,可形成不溶性蛋白鹽而下沉。產(chǎn)生白色渾濁或沉淀。潘氏試驗(yàn)不僅對白蛋白起反應(yīng),對球蛋白也起反應(yīng),且對蛋白質(zhì)比較敏感,當(dāng)總蛋白超過250mg/L,醫(yī)學(xué)教.育網(wǎng)搜集即可呈陽性。尿分析儀法檢測蛋白質(zhì)是采用參考空白及測量波長、參考波長,利用pH指示劑蛋白誤差原理,其靈敏度為300mg/L,且只對白蛋白敏感,對球蛋白不敏感。在腦脊液檢測中,球蛋白檢測意義更大,因?yàn)楫?dāng)有腦組織和腦膜疾病時,大多伴有球蛋白增高,而尿分析儀并不能客觀地反映出來,而且尿分析儀結(jié)果的級差范圍較大,與潘氏試驗(yàn)判定結(jié)果的分級也不能完全吻合。因此筆者認(rèn)為腦脊液蛋白質(zhì)的檢測不宜使用尿分析儀。
2 用尿分析儀測定腦脊液葡萄糖
尿分析儀采用干化學(xué)法檢測葡萄糖,檢測范圍5~220mmol/L,靈敏度2~5mmol/L,大劑量青霉素、左旋多巴等均可導(dǎo)致假陰性;腦脊液中葡萄糖含量僅為2.5~4.5mmol/L,多數(shù)病理情況下更低,用干化學(xué)法測定只能在-~+之間,診斷能力較差。對腦脊液葡萄糖測定,在《規(guī)程》中已刪除葡萄糖半定量試驗(yàn),用定量檢測法取代了半定量法。因此筆者認(rèn)為腦脊液葡萄糖的檢測也不宜使用尿分析儀。
3 用生化分析儀測定腦脊液葡萄糖、蛋白質(zhì)和氯離子生化分析儀主要是檢測血清中的各種成分,而《規(guī)程》中腦脊液葡萄糖、蛋白質(zhì)和氯離子的檢測方法與血清基本相同,因此用生化分析儀對腦脊液葡萄糖、蛋白質(zhì)和氯離子等項目定量測定符合臨床需要,既快又準(zhǔn),方法可行。
4 用尿分析儀測定腦脊液中紅細(xì)胞和白細(xì)胞數(shù)量
《規(guī)程》中用細(xì)胞計數(shù)板和顯微鏡,并對不同細(xì)胞含量的腦脊液進(jìn)行適當(dāng)稀釋或不稀釋,直接用顯微鏡目測計數(shù),只能檢出有形的細(xì)胞成分,而溶解的細(xì)胞檢測不到;尿分析儀檢測紅細(xì)胞是檢測血紅蛋白中的亞鐵血紅素,既對有形的紅細(xì)胞敏感,又對溶解的紅細(xì)胞敏感。尿分析儀檢測白細(xì)胞是檢測白細(xì)胞酯酶,醫(yī).學(xué)教.育網(wǎng)搜.集整理這種酶主要在粒細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有,淋巴細(xì)胞不含有。多數(shù)腦、腦膜疾病的腦脊液細(xì)胞增多時,不僅僅是粒細(xì)胞增多,淋巴細(xì)胞也增多,故用尿分析儀試紙法檢測會產(chǎn)生低值或假陰性。尿分析儀檢測細(xì)胞只是半定量,無法準(zhǔn)確計數(shù)白細(xì)胞,更無法對白細(xì)胞進(jìn)行分類,達(dá)不到現(xiàn)在臨床的要求。因此筆者認(rèn)為腦脊液紅細(xì)胞和白細(xì)胞計數(shù)不宜使用尿分析儀。
5 用UF-100或UF-50計數(shù)腦脊液中紅細(xì)胞、白細(xì)胞數(shù)量
UF-100或UF-50是利用流式細(xì)胞和電阻抗原理開發(fā)出來的全自動分析儀。該儀器以激光散射強(qiáng)度、散射寬度、熒光強(qiáng)度、熒光寬度和電阻抗的大小識別計數(shù)尿中紅細(xì)胞、白細(xì)胞等顆粒,可以檢測到低細(xì)胞量的體液標(biāo)本,腦脊液中有形成分的組成更簡單,細(xì)胞以外的干擾粒子很少且顆粒總數(shù)一般在儀器設(shè)定的范圍內(nèi),這為UF-100或UF-50靈敏而精確地鑒別和計數(shù)腦脊液中細(xì)胞成分提供了有利條件。用儀器計數(shù)細(xì)胞數(shù),檢測結(jié)果客觀,不受主觀因素的影響,且具有良好的重復(fù)性。因此筆者認(rèn)為用UF-100或UF-50尿沉渣分析儀計數(shù)腦脊液細(xì)胞數(shù)量方法可行。
6 用血細(xì)胞分析儀計數(shù)腦脊液中紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)及分類
血細(xì)胞分析儀主要是計數(shù)血液中細(xì)胞數(shù)量的,而多數(shù)腦脊液中細(xì)胞總數(shù)不在儀器設(shè)定的范圍內(nèi),計數(shù)誤差較大,一般不宜使用;如果腦脊液為血性,可直接用血細(xì)胞分析儀測量,或用血細(xì)胞分析儀的稀釋模式檢測,但并不稀釋腦脊液,而是把檢測結(jié)果除以一個系數(shù)(這個系數(shù)為用稀釋模式做血液細(xì)胞計數(shù)時的稀釋倍數(shù))即可,且可以對白細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù)。
隨著自動化儀器的發(fā)展、更新,自動化檢測儀器的種類越來越多,本文只對現(xiàn)在較常見儀器的原理進(jìn)行了分析,對一些特殊儀器,如1991年日本某公司發(fā)明的Urine-TP試劑帶,它使用類似考馬斯亮藍(lán)法,能同時測定白蛋白、球蛋白及本一周氏蛋白,其能否對腦脊液中蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測還有待于進(jìn)一步研究。一機(jī)多用固然是好,但要在保證質(zhì)量的前提下,正確地開發(fā)使用,以更好地為臨床提供及時、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)報告。