一、標本采集

　　正確地采集標本是細胞學診斷的基礎(chǔ)和關(guān)鍵之一，故要準確地選擇部位，盡可能在病變區(qū)直接采集細胞。采集的標本必須保持新鮮，盡快制得，以免細胞自溶或腐敗。盡可能避免血液、粘液等混入標本內(nèi)，采集方法應(yīng)簡便，操作輕柔，避免病人痛苦和引起嚴重并發(fā)癥及促進腫瘤擴散，下面介紿幾種常用的標本采集方法。

　　（一）直視采集法

　　外陰、陰道、陰道穹窿、宮頸、口腔、肛管、鼻腔、鼻咽部、眼結(jié)膜及皮膚等部位，可以直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗、食管、胃、直腸、氣管和肺內(nèi)支氣管則使用纖維內(nèi)鏡在病灶處直接刷取細胞制片。

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　　1.痰液涂片檢查：痰興高采烈為支氣管等呼吸的分泌物，醫(yī)|學教育網(wǎng)搜集整理對支氣管肺癌和其它呼吸道疾病細胞學診斷具有重要價值。

　　2.尿液涂片檢查：收集尿液中脫落的泌尿道細胞成分，作泌尿道腫瘤和某些疾病的細胞學診斷。

　　3.乳頭溢涂片檢查：用于導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤和乳腺癌細胞學檢查。

　　4.前列腺液涂片檢查：采用前列腺按摩法取得分泌物，作前列腺細胞學診斷。

　　（三）灌洗洗

　　向空腔器官或腹腔、盆腔（剖腹探查時）灌注一定量生理鹽水沖洗，使其細胞成分脫落于液體中，收集灌洗液離心制片，作細胞學檢查。

　　（四）磨擦法

　　利用磨擦工具在病變部位磨擦，將擦取物直接涂片。常用磨擦工具有海棉磨擦器、線網(wǎng)套、氣囊等?？煞謩e用于鼻咽部、食管和胃部病灶的取材。

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　　當有胸腔、腹腔、心包腔及關(guān)節(jié)腔積液時，可用針穿抽吸部分積液作細胞學檢查。此外某些深部組織器官，如淋巴結(jié)、甲狀腺、軟組織、肝等亦可作細針穿刺吸取部分細胞進行涂片診斷。

　　二、涂片制作方法

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　　1.涂片前準備工作

　?。?）保證標本新鮮，取材后盡快制片。

　?。?）涂操作要輕巧，避免擠壓以防止損傷細胞。涂片要均勻，厚薄要適度，太厚細胞堆疊，太薄細胞過少，均影響診斷。

　?。?）玻片要清潔無油漬，先用硫酸洗滌液浸泡沖洗，再用75%乙酸浸泡。

　　（4）含蛋白質(zhì)的標本可直接涂片，缺乏蛋白質(zhì)的標本，涂片前先在玻片上涂薄層粘附劑，以防止染色時細胞脫落，常用粘附劑為蛋白甘油，由等量生雞蛋白和甘油混合而成。

　?。?）每位患者的標本至少涂兩張玻片，以避免漏診。涂片后立即在玻片一端標上編號。

　　2.涂片制備方法

　?。?）推片法：用于稀薄的標本，如血液，胸、腹水等。取離心后標本一小滴滴在玻片偏右側(cè)端，用推片用30度夾角將玻片上檢液輕輕向左推。

　?。?）涂抹法：適用于稍稠的檢液，如鼻咽部標本。用竹棉簽在玻片上涂布，由玻片中心經(jīng)順時針方向外轉(zhuǎn)圈淫抹；或從玻片一端開始平行涂抹，涂抹要均勻，不宜重復(fù)。

　?。?）壓拉涂片法：將標本夾于橫豎交叉的兩張玻片之間，然后移動兩張玻片，使之重疊，再邊壓邊拉，獲得兩張涂片。該法適用于較粘稠標本，如痰液。

　?。?）吸管推片法：用吸和將標本滴在玻片一端，然后將滴管前端平行置于標本滴上，平行向另一端均速移動滴管即可推出均勻薄膜。此法亦適用于胸、腹水標本。

　　（5）噴射法：用配細針頭的注射器將標本從左至右反復(fù)均勻地噴射在玻片上，此法適用于各種吸取的液體標本。

　?。?）印片法：將切取的病變組織用手術(shù)切開，立即將切面平放在玻片上，輕輕按印。此方法為活體組織檢查的輔助方法。

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　　固定（fication）的目的是保持細胞自然形態(tài)，防止細胞自溶和細菌所致的腐??；固定液能沉淀和凝固細胞內(nèi)蛋白質(zhì)和破下細胞內(nèi)溶酶體酶，使細胞不但保持自然形態(tài)，而且結(jié)構(gòu)清晰，易于著色。因此標本愈新鮮，固定愈及時，細胞結(jié)構(gòu)愈清晰，染色效果愈好。

　　1.固定液：細胞學檢查常用的固定液有下列三種：第一種乙醚酒清固定液：該固定液滲透明性較強，固定效果好適用于于一般細胞學常規(guī)染色；二種是氯仿酒精固定液：又稱卡諾氏固定液。其優(yōu)點同上；第三種95%酒精固定液：適用于大規(guī)模防癌普查。制備簡單。但滲透作用稍差。

　　2.固定方法

　　（1）帶濕固定：涂片后未待標本干燥即行固定的方法稱帶濕因定。此法因定細胞結(jié)構(gòu)清楚，染色新鮮。適用于巴氏或HE染色。痰液、陰道分泌物及食管拉網(wǎng)涂片等常任常用此方法。

　?。?）干燥因定：涂片后未待其自然干燥，再行固定。適用于稀薄標本如尿液、胃沖洗液等，也適用于于瑞特染色和姬姆薩染色。

　　3.固定時間：一般為15-30min.含粘液較多標本，如痰液、陰道分泌物、食管拉網(wǎng)等因定時間在適當延長；尿液、胸、腹水等涂片不含粘液，固定時間可酌情縮短。