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1、支原體培養(yǎng)。標本的取材男性為尿道內口約0.5cm以上，女性提倡子宮頸棉拭子取材，而不用尿培養(yǎng)。支原體的培養(yǎng)和鑒定是確診支原體感染的唯一方法。每種培養(yǎng)基都用酚紅作標記，人型支原體和脲原體可使培養(yǎng)基變成粉紅色。

2、支原體血清學鑒定。1984年開始使用一種微量的酶標免疫法，能檢測支原體的8種血清型抗體。這對于診斷患者為哪一種支原體血清型感染是很有幫助的。但臨床上，不必都作支原體血清型鑒定，通過支原體培養(yǎng)證明有支原體感染，馬上積極治療是非常必要的。