［方法學(xué)評(píng)價(jià)］ 隱血試驗(yàn)（occultblood test，OBT）目前主要采用化學(xué)法。如鄰聯(lián)甲苯胺法、還原酚酞法、聯(lián)苯胺法、匹拉米洞法，無(wú)色孔雀綠法、愈創(chuàng)木酯法等。其實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理基本于血紅蛋白中的含鐵血紅素部分有催化過氧化物分解的作用，能催化試劑中的過氧化氫，分解釋放新生態(tài)氧，氧化上述色原物質(zhì)而呈色。呈色的深淺反映了血紅蛋白多少，亦即出血量的大小。經(jīng)上試驗(yàn)方法雖然原理相同，但在實(shí)際應(yīng)用中卻由于糞便的成分判別很大，各實(shí)驗(yàn)室具體操作細(xì)節(jié)如糞便取材多少，試劑配方、觀察時(shí)間等不同，而使結(jié)果存在較在差異。醫(yī)學(xué)教|育網(wǎng)搜集整理多數(shù)方獻(xiàn)應(yīng)用稀釋度的血紅蛋白液對(duì)這些方法靈敏度的研究表明，鄰苯甲苯胺法、鄰甲苯胺法、還原酚酞法最靈敏，可檢測(cè)出0.2-1mg/L的血紅蛋白，只要消化道有1-5ml的出血就可檢出。還原酚酞法由于試劑極不穩(wěn)定，放置可自發(fā)氧化變紅而被摒棄。高度靈敏的鄰聯(lián)甲苯胺法常容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，中度靈敏的試驗(yàn)包括聯(lián)苯胺法、無(wú)色孔雀綠法，可檢出1-5mg/L的血紅蛋白，消化道有5-10ml出血即為陽(yáng)性。聯(lián)苯胺法由于有致癌作用而無(wú)色孔雀綠法在未加入異喹啉時(shí)靈敏度差，需（20mg/L血紅蛋白，）試劑配制和來(lái)源均不如拉米洞方法方便。愈創(chuàng)木酯法靈敏度關(guān)，需6-10ml/L血紅蛋白才能檢出，此時(shí)消化道出血可達(dá)20ml但假陽(yáng)性很少，如此法為陽(yáng)性，基本可確診消化道出血。目前國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)應(yīng)用四甲基礎(chǔ)聯(lián)苯胺和愈創(chuàng)木酯為顯色基質(zhì)的隱血試帶，使隱血試驗(yàn)更為方便，但未要么本解決隱血試驗(yàn)方法的學(xué)中的問題。

以上各種隱血試驗(yàn)化學(xué)法雖簡(jiǎn)單易行，但均基于血紅蛋白中的血紅素可促使又氧水分解釋放新生態(tài)氧，使色原物質(zhì)氧化這一原理，方法上缺乏特異準(zhǔn)確性。此外化學(xué)試劑不穩(wěn)定，久置后可使反應(yīng)減弱。外源性動(dòng)物儀器如含有血紅蛋白，肌紅蛋白、其血紅素的作用均可使試驗(yàn)呈陽(yáng)性，大量生食蔬菜中含有活性的植物過氧化物酶也可催化雙氧水分解，出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)，所以除愈創(chuàng)木酯法外均要求素食3天，為此有人提出將糞便用水作1：3稀釋加熱煮沸再加冰乙酸和乙醚提取血紅蛋白測(cè)定可排除干擾。此法雖然可靠，但不適用于常規(guī)工作。加外血液如在腸道停留過久，血紅蛋白被細(xì)菌降解，血紅素不復(fù)存在，則會(huì)出現(xiàn)與病情不符的陰性結(jié)果，病人服用大量維生素C劃其它具有還原作用的藥物，以實(shí)驗(yàn)中可使過氧化物還原，不能再氧化色原物質(zhì)，亦可使隱血試驗(yàn)呈假陰性。除上樁干擾隱血試驗(yàn)亦可由于檢驗(yàn)人員取材部位不同，標(biāo)本反應(yīng)時(shí)間不同，檢驗(yàn)員對(duì)顯色判斷不同，故在不同一方法的試驗(yàn)中，還可產(chǎn)生誤差等，致使目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)統(tǒng)一公認(rèn)的推薦的方法，更談不到實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化。

為解決隱血試驗(yàn)的特異性問題及鑒別消化道出血部位，當(dāng)前發(fā)展的最快的是免疫學(xué)方法，如免疫單擴(kuò)法、對(duì)泫免疫電泳、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、免疫斑點(diǎn)法、膠乳免疫化學(xué)凝聚淪，放射免疫擴(kuò)散法、反向間接血凝法、膠體金標(biāo)記夾心免疫檢驗(yàn)法等，此類試驗(yàn)所用抗體分為兩大類，一種為抗人血紅蛋白抗體，加一種抗人紅細(xì)胞基質(zhì)抗體。免疫學(xué)方法具有很好的靈敏度，一般血紅蛋白為0.2mg/L，0.03mg/g糞便就可得到陽(yáng)性結(jié)果，且有很高的特異性，各種動(dòng)物血血紅蛋白在500mg/L辣根過氧化物酶在2000mg/L時(shí)不會(huì)出現(xiàn)干擾，因而不需控制飲食，據(jù)Herzog和Cameron等研究，正常人24小時(shí)胃腸道生理性失血量為0.6ml，若每日在于2ml，則屬于病理性出血。由于免疫學(xué)方法的高度敏感性，又由于有正常的生理性失血，如此高的靈敏度，要在某些正常人特別是服用刺激備用腸道藥物后可造成假陽(yáng)性。但免疫學(xué)支隱血試驗(yàn)主要檢測(cè)下消化道的優(yōu)點(diǎn)，目前被認(rèn)為是對(duì)大腸癌普查最適用的試驗(yàn)，免疫學(xué)法隱血試驗(yàn)主要檢測(cè)下消化道出血，約有40-50%的上消化道出血不能檢出。原因是：①血紅蛋白或紅細(xì)胞經(jīng)過消化酶降解就業(yè)性或消化殆盡已不具有原來(lái)免疫原性；②過量大出血而致反應(yīng)體系中抗原過剩出現(xiàn)前帶現(xiàn)象；③病人血紅蛋白的抗原與單克隆抗體不配，因此有時(shí)外觀為柏油樣便而免疫法檢查卻呈陰性或弱陽(yáng)性，此進(jìn)需將原已稀釋的糞便再稀釋50-100倍重做或用化學(xué)法復(fù)，檢。近年來(lái)某些實(shí)驗(yàn)室還采用卟啉熒光法血紅蛋白定量試驗(yàn)，用縶草酸試劑使血紅素變?yōu)檫策M(jìn)行熒光檢測(cè)，這樣除可測(cè)糞澡未降解的血紅蛋白外，還可測(cè)血紅素衍化物卟啉，從而克服了化學(xué)法和免疫法受血紅蛋白降解影響缺點(diǎn)，可對(duì)上、下消化道出血同樣敏感，但外源性血紅素、卟啉類物質(zhì)具有干擾性，且方法較復(fù)雜，故不易推廣使用。此外免疫學(xué)的方法也從檢測(cè)血紅蛋白與人紅細(xì)胞基質(zhì)擴(kuò)展到測(cè)定糞便中其它隨出血而出現(xiàn)的帶有良好的抗原性而又不易迅速降的蛋白質(zhì)、如白蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等，靈敏度達(dá)2mg/L.

［臨床意義］ 糞便隱血檢查對(duì)消化道出血的診斷有重要價(jià)值。消化性潰瘍、藥物致胃粘膜損傷（如服用消炎痛、糖皮質(zhì)激素等）、腸結(jié)核、克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、結(jié)腸息肉、鉤蟲病及胃癌、結(jié)腸癌等消化腫瘤時(shí)，糞便隱知試驗(yàn)均常為陽(yáng)性，故須結(jié)合臨床其它資料進(jìn)行鑒別診斷在消化性潰瘍時(shí)，陽(yáng)性率為40-70%，呈間斷性陽(yáng)性。消化性潰瘍治療后當(dāng)糞便外觀正常時(shí)，隱血試驗(yàn)陽(yáng)性仍可持續(xù)5-7天，此后如出血完全停止，隱血試驗(yàn)即可轉(zhuǎn)陰。消化道癌癥時(shí)，陽(yáng)性率可達(dá)95%.呈持續(xù)性陽(yáng)性，故糞便隱血試驗(yàn)常作為消化道惡性腫瘤診斷的一個(gè)篩選指標(biāo)。尤其對(duì)中老年人早期發(fā)現(xiàn)消化道惡性腫瘤有重要價(jià)值。此外在流行性出血熱患者的糞便中隱血試驗(yàn)也有84%的陽(yáng)性率，可作為該病的重要的佐證。