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如何正確理解自身抗體實驗室檢測結(jié)果-免疫檢驗

2013-11-17 10:42 來源:
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如何正確理解自身抗體實驗室檢測結(jié)果是檢驗技士考試復(fù)習(xí)需要了解的知識,醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)搜索整理如下:

1.自身抗體滴度與疾病的相關(guān)性

有些自身抗體是高特異性指標(biāo)。如抗Sm抗體對SLE、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗體對AIH等,一旦出現(xiàn)陽性(即使是低滴度),基本上就可做出診斷。但如果這些指標(biāo)為陰性,也不能排除相關(guān)疾病的存在。相反有些指標(biāo)雖然在疾病中的陽性率比較高,但特異性差,在很多疾病甚至健康人群中均可出現(xiàn)陽性(如ANA),這種抗體只有在高滴度時,才對相關(guān)疾病有診斷意義。自身抗體的滴度不僅對疾病診斷非常重要,并且有些抗體的滴度(如抗dsDNA抗體)與疾病的活動度密切相關(guān),可用于療效和病程監(jiān)控。

2.關(guān)于抗核抗體(ANA)的滴度范圍

檢測ANA的標(biāo)準(zhǔn)方法為間接免疫熒光(IIF)法,最好用Hep-2細(xì)胞和靈長類肝冰凍組織切片作為檢測基質(zhì)。我科實驗室采用的是德國歐蒙公司Hep-2/猴肝檢測ANA間接免疫熒光試劑盒。其起始稀釋度為1:100,滴度超過1:320時,則提示自身免疫性疾病。由于不同檢測系統(tǒng)的起始稀釋度和滴度系統(tǒng)不同,檢測到的滴度數(shù)值不能直接進(jìn)行比較。對ANA的結(jié)果不僅要關(guān)心其定性和滴度結(jié)果,同時還應(yīng)了解所用檢測系統(tǒng)的實驗基質(zhì)和起始稀釋度(正常參考范圍)。我科實驗室ANA(IIF)的臨界值(起始稀釋度)為1:100.在正常人群中ANA陽性率3-15%,抗體滴度較低,在年齡大于60歲的正常人群中ANA陽性率可高達(dá)10-37%.ANA滴度及臨床意義如下:ANA滴度熒光強(qiáng)度臨床意義<1:100-ANA陰性,血清標(biāo)本中未檢出抗核抗體。

1:100(+)可疑陽性,繼續(xù)追蹤觀察。少數(shù)正常人群也可能陽性。

1:320+弱陽性,提示可能存在相關(guān)疾病。極少數(shù)正常人也可能陽性。

1:1000++中等陽性,提示可能存在相關(guān)疾病。

1:3200+++強(qiáng)陽性,高度提示存在相關(guān)疾病。

1:10000++++很強(qiáng)的陽性,高度提示存在相關(guān)疾病。

3.自身抗體檢測方法對結(jié)果的影響

不同的檢測方法對實驗結(jié)果有一定影響,如抗dsDNA抗體檢測常用的方法有ELISA、放射免疫分析法和間接免疫熒光法(IIF)。這三種方法所能檢測的抗體的親和力差別很大,放射免疫法的特異性最高,IIF次之,ELISA較差。因此ELISA檢出抗dsDNA陽性時,應(yīng)用其它方法確認(rèn)。

4.自身抗體流行病學(xué)資料的積累

在IIF檢測時,很多熒光模型相對應(yīng)的靶抗原尚不清楚,且這些熒光模型的臨床意義不明確。隨著對自身免疫性疾病及其相關(guān)自身抗體研究的深入,越來越多的以前認(rèn)為沒有臨床意義的抗體成為新的研究焦點。因而對于這些結(jié)果,實驗室也應(yīng)該報告,以引起臨床的重視,通過臨床和實驗室的共同努力,不斷積累這些熒光模型的流行病學(xué)資料。

5.為何患者ANA陽性,卻無明顯臨床癥狀?

ANA陰性結(jié)果提示患者體內(nèi)不存在抗核抗體。若患者僅僅出現(xiàn)ANA陽性結(jié)果而無其他臨床表現(xiàn)或指征,則并不提示自身免疫性疾病。主要原因如下:1)ANA在健康人群中的陽性率約為3-15%,而且ANA的產(chǎn)生與患者的年齡相關(guān),年齡在65歲以上的健康人群ANA陽性率可高達(dá)10-37%.另外健康人群在感染病毒的情況下,也可能出現(xiàn)ANA陽性,但這些抗體多為短暫出現(xiàn)。

2)一些藥物治療可能引起ANA陽性。因此ANA陽性需結(jié)合患者用藥情況綜合判斷。

3)一些特殊疾?。ㄈ缒[瘤)也可能導(dǎo)致ANA陽性。

目前已有的研究表明,自身抗體往往早于臨床癥狀出現(xiàn)。對于SLE患者而言,至少有一種以上SLE相關(guān)自身抗體在臨床診斷前即已出現(xiàn)(最早達(dá)9.4年前,平均為3.3年),而且抗體與疾病特異性越高,出現(xiàn)的時間越晚。另外,隨著SLE病情進(jìn)展,抗體產(chǎn)生的數(shù)量逐漸增加(見參考文獻(xiàn)[1])。

6.如何認(rèn)識間接免疫熒光法ANA陰性,而印跡法靶抗原(SSA、Jo-1、M2、和dsDNA等)結(jié)果陽性的實驗結(jié)果?

客觀上不同的檢測方法學(xué)之間存在敏感度和特異性的差異。因此針對上述問題應(yīng)根據(jù)靶抗原的實際結(jié)果,進(jìn)行具體情況具體分析。

1)由于SSA和Jo-1抗原在真核細(xì)胞中的表達(dá)量不高,而且細(xì)胞固定劑對于抗原結(jié)構(gòu)也可能產(chǎn)生影響,因此基于培養(yǎng)細(xì)胞作為基質(zhì)的間接免疫熒光法絕非抗SSA和Jo-1抗體的最佳檢測方法(見參考文獻(xiàn)[2])。

2)抗線粒體M2抗體對PBC疾病的診斷具有良好的敏感性和特異性。有研究表明臨床明確診斷的PBC患者樣本,即使應(yīng)用大鼠腎檢測抗線粒體M2抗體也可能出現(xiàn)熒光法陰性而重組抗原方法陽性的結(jié)果(見參考文獻(xiàn)[3])。

3)對于dsDNA抗體臨床檢測,由于不同實驗體系中所應(yīng)用的抗原來源不同、抗原呈現(xiàn)形式不同以及反應(yīng)條件不同等因素的影響,因此不同實驗方法學(xué)之間的結(jié)果并不具備可比性(見參考文獻(xiàn)[4])。

7.單獨出現(xiàn)Ro52抗體陽性是否具有臨床意義?

目前已有的研究表明,抗SSA抗體主要提示干燥綜合癥、SLE和新生兒紅斑狼瘡等疾病。但Ro52抗體在許多疾病中(如風(fēng)濕性疾病、感染性疾病和自身免疫型肝病等)均有一定的發(fā)生率,因此單獨Ro52抗體陽性結(jié)果缺乏疾病,需結(jié)合其他檢測指標(biāo)或臨床癥狀綜合判斷。例如自身免疫性肝炎患者出現(xiàn)SLA/LP抗體和Ro52抗體同時陽性,則提示患者病情較重、預(yù)后較差。

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