1.致流產(chǎn)和抗早孕作用

1.1.注射用天花粉對(duì)早孕兔子宮收縮的影響：

實(shí)驗(yàn)用成熟雌兔。以交配日作為妊娠第1日。妊娠第10日時(shí)，在戊巴比妥鈉麻醉下，經(jīng)腹部切口將連有細(xì)塑料管的乳膠水囊（容積約1ml）置入一側(cè)子宮腔內(nèi)。細(xì)塑料管經(jīng)腹部和背部皮下，從頸部引出。腹部創(chuàng)口縫復(fù)。次日起在清醒狀態(tài)下記錄手術(shù)兔的宮內(nèi)壓變化。描記子宮活動(dòng)時(shí)，將細(xì)塑料管和乳膠囊以水充盈，塑料管與壓力換能器連接，通過(guò)記錄儀描記子宮收縮活動(dòng)曲線。所有實(shí)驗(yàn)兔在給藥前均先記錄子宮自發(fā)活動(dòng)，并作催產(chǎn)素試驗(yàn)，即由兔耳緣靜脈注射合成催產(chǎn)素（上海第十制藥廠產(chǎn)品）0.1單位后，觀察子宮反應(yīng)。給藥后24，48，72小時(shí)重復(fù)記錄子宮自發(fā)活動(dòng)和催產(chǎn)素試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)共分4組，每組用兔4-5只。對(duì)照組：不給任何藥物，僅肌肉注射生理鹽水0.5ml/兔；天花粉組：妊娠第11日時(shí)，肌注注射用天花粉（上海生化制藥廠產(chǎn)品，系天花粉蛋白的粗提物的無(wú)菌冷凍干燥制 劑，每安瓿含2mg），2mg/kg；甲地孕酮10日天花粉組：于注射天花粉前1小時(shí)，肌肉注射甲地孕酮混懸液（由上海第十二制藥廠提供）10mg/kg；消炎痛加天花粉組：除肌肉注射天花粉（2mg/kg）外，同時(shí)還于妊娠第11、l2、l3日時(shí)，肌肉注射消炎痛（以麻油配制），每日2次，每次劑量5mg/kg。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，早孕兔的子宮處于完全的靜息狀態(tài)，對(duì)催產(chǎn)物質(zhì)的刺激缺乏反應(yīng)，但注射足夠量的天花粉后24或48小時(shí)，就見(jiàn)子宮自發(fā)活動(dòng)逐漸加強(qiáng)，子宮對(duì)催產(chǎn)物質(zhì)的反映性也明顯提高醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。

此外，上述實(shí)驗(yàn)還證明，天花粉在一定劑量時(shí)，對(duì)突也有明顯抗早孕作用。它可使胚泡壞死、液化，終致完全吸收。天花粉對(duì)兔子宮肌的激活作用，雖可被補(bǔ)充外源性孕激素或應(yīng)用前列腺素合成抑制所防止，但天花粉的抗早孕作用卻不被對(duì)抗。這一結(jié)果提示天花粉終止妊娠的作用，并非繼發(fā)于激素分泌的抑制，或前列腺素的合成和釋放，從而支持天花粉直接作用于胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞終止妊娠的結(jié)果。

另有報(bào)道，取家兔子宮角1.5cm左右懸掛于通氣鉤上，置瑪氏浴槽中，其中有營(yíng)養(yǎng)液50ml，通以95%O2和5%CO2的混合氣體，水浴37℃，子宮活動(dòng)用杠桿描記于記紋鼓上。先描記子宮自發(fā)活動(dòng)30分鐘，然后再加入15-甲基前列腺素F2a（15-甲-PGF2a），測(cè)定子宮張力或收縮頻率和幅度增加的15-甲-PGF2d最低閾值濃度。對(duì)照組動(dòng)物共進(jìn)行了6只離體子宮實(shí)驗(yàn)，除一個(gè)子宮有自發(fā)節(jié)律收縮外其余5只子宮均無(wú)自發(fā)收縮，加入15-甲-PGF2a引起張力增加的最低閾濃度為10-1000mg/ml，天花粉組進(jìn)行離體實(shí)驗(yàn)的6只子宮中有5只子宮有明顯自發(fā)節(jié)律收縮，僅一只子宮無(wú)自發(fā)收縮，加入15-甲-PGF2a引起興奮的最低閾濃度為l-10mg/ml。實(shí)驗(yàn)表明，天花粉能使假孕兔子宮于用藥后24小時(shí)自發(fā)收縮活動(dòng)增加。

1.2.注射用天花粉對(duì)假孕兔子宮孕酮受體（P-R）和雌醇受體（E-R）的影響：取健康成熟雌兔，體重2.5kg以上，靜脈注射人絨毛膜促性腺激素（HCG）500單位以產(chǎn)生假孕，注射當(dāng)天作為假孕1日，然后將動(dòng)物分成2組，每組7-8只。于假孕第6日、7日給天花粉組每天肌肉注射天花粉注射劑（上海生化制藥廠生產(chǎn)，臨用前用生理鹽水溶解到5mg/2ml）2mg/kgl次。對(duì)照組每天注射生理鹽水0.8ml/kgl次。于第8日由耳緣靜脈取血2ml于含肝素（約0.5mg）的離心管中，離心得血漿供測(cè)孕酮用。然后將兔放血處死，立即剖腹取下子宮，剪取一段子宮放入營(yíng)養(yǎng)液中，供進(jìn)行離體子宮實(shí)驗(yàn)，其余部分用冰生理鹽水洗3次，剪碎后與緩沖液按1：3（W/V）比例混合，置于勻漿管中，在低溫條件下制成勻漿，供受體測(cè)定用。P-R、E-R的測(cè)定和KA值的求得采用放射受體測(cè)定法，參考Rayard等和Andersan等的方法結(jié)合本實(shí)驗(yàn)條件略加修改。按Loury法測(cè)定子宮胞質(zhì)液的蛋白含量，二苯胺法測(cè)定子宮細(xì)胞核的DNA含量，胞質(zhì)液受體fmol/mg蛋白表示，核受體是以fmol/mgDNA表示。作Scatchardplot求得孕酮和P-R及雌二醇和E-R的KA值。血漿孕酮濃度測(cè)定按horneycroft報(bào)告的方法，以11a羥孕酮琥珀酸酐牛血清蛋白為抗原，對(duì)家兔進(jìn)行免疫，抗血清效價(jià)1：2000以上。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，假孕第八天子宮胞質(zhì)液和細(xì)胞核的P-R含量經(jīng)t測(cè)驗(yàn)，兩組間有顯著差異，說(shuō)明注射天花粉后，能使假孕兔子宮的P-R含量降低。作Scatchardplot求得孕酮和胞質(zhì)液P-R的KA值：對(duì)照組KA=1.08x10(9)M-1，天花粉組KA=0.28x10(9)M,說(shuō)明天花粉使孕酮和P-R的親和力明顯下降。假孕第八天子宮胞質(zhì)液和細(xì)胞核的E- R含量，經(jīng)t測(cè)驗(yàn)，二組間無(wú)明顯差異，雌二醇和E-R的KA值：對(duì)照值KA=1.01x10(9)M-1，天花粉組KA=1.1×10(9)M-1，兩組間也無(wú)顯著差異，表明天花粉組對(duì)假孕兔子宮E-R無(wú)明顯影響。假孕兔第8日血漿孕酮濃度對(duì)照組與天花粉組之間無(wú)明顯差異。

一般認(rèn)為子宮活動(dòng)受激素調(diào)節(jié)，Csapo等報(bào)道妊娠子宮所以處于靜息狀態(tài)，是與體內(nèi)血漿孕酮濃度較高有關(guān)，妊娠兔子宮活動(dòng)可被孕酮所阻抑，并使之對(duì)催產(chǎn)素和前列腺素均不敏感。束懷德等。曾報(bào)導(dǎo)天花粉能使妊娠兔子宮自發(fā)收縮活動(dòng)增加，認(rèn)為這種作用可能與天花粉損傷胚胎，使體內(nèi)孕酮水平下降及促使蛻膜釋放前列腺素有關(guān)。實(shí)驗(yàn)采用假孕兔測(cè)得第8日的血漿孕酮濃度，與Balduin等，報(bào)道的同期孕兔血漿孕酮濃度相近，注射天花粉后孕酮濃度并不下降，與對(duì)照血相似，但能使子宮自發(fā)收縮明顯增加，說(shuō)明天花粉對(duì)胚胎和蛻膜的損傷以及繼發(fā)的孕酮下降，可能不是天花粉引起子宮自發(fā)收縮增加的主要機(jī)理。Hai等報(bào)道妊娠大鼠在臨床前子宮細(xì)胞核中P-R含量下降，認(rèn)為臨床子宮活動(dòng)增加是由于子宮內(nèi)P-R含量減少所致。實(shí)驗(yàn)曾觀察到15-甲-PGF2a對(duì)假孕兔有溶黃體作用，血漿孕酮濃度于注射15-甲-PGF2a后24小時(shí)下降到極低水平，此時(shí)子宮P-R受體含量增加，子宮并無(wú)明顯自發(fā)收縮仍處于靜息狀態(tài)。天花粉不改變假孕兔血漿孕酮濃度，但使子宮P-R含量降低并使孕酮與P-R的親和力下降，而同時(shí)子宮自發(fā)收縮活動(dòng)明顯增加。因此設(shè)想，天花粉使子宮P-R含量減少和使孕酮與P-R的親和力降低，可能是天花粉使子宮自發(fā)收縮活動(dòng)增加的重要機(jī)理，子宮P-R可能與子宮活動(dòng)調(diào)節(jié)有關(guān)。

1.3.天花粉對(duì)小鼠抗早孕的作用：

取成熟雌、雄小鼠以2：1合籠，每日上午檢查陰道，以 發(fā)現(xiàn)陰栓日為妊娠1日。于妊娠4、5日,每日皮下注射l次天花粉每10g體重注射0.1ml，于妊娠第8天解剖，記錄妊娠動(dòng)物數(shù)。天花粉劑量為10、5、2.5、1.25、0.625mg/kg時(shí)，妊娠抑制率分別為100%、81.17%、47.16%、47.16%和12.69%，用簡(jiǎn)化機(jī)率單位法算得天花粉抗早孕作用半數(shù)有效量為1.78±0.28mg/kg。

文獻(xiàn)報(bào)道，單獨(dú)給予天花粉0.4mg肌肉注射，對(duì)早孕小鼠的抑制效果并不理想。上述實(shí)驗(yàn)也觀察到天花粉能終止小鼠早期妊娠，作用隨劑量增加而提高，但在采用使妊娠抑制率達(dá)到80%以上的劑量時(shí)，可使小鼠體重明顯減輕，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生一定毒性。這說(shuō)明在臨床上可能因受到藥物毒性的限制，不能通過(guò)增加天花粉的劑量來(lái)達(dá)到提高療效和縮短流產(chǎn)時(shí)間的目的。

1.4.外源性甲地孕酮和絨毛膜促性腺激素對(duì)天花粉抗早孕作用的影響方法同上。于妊娠4、5日，每日皮下注射天花粉10mg/kg，同時(shí)皮下注射甲地孕酮水混懸液50mg/kg，或腹腔注射絨毛膜促性腺激素（HCG）10I.U，妊娠8日解剖，記錄妊娠動(dòng)物數(shù)。結(jié)果見(jiàn)表3。合并注射的兩組妊娠抑制率均下降。且胚胎均較對(duì)照組為小，其中有的與子宮內(nèi)膜分離，游離于子宮腔內(nèi)。

1.5.大花粉與15-甲-PGF2a合并用藥對(duì)小鼠的抗早孕作用：

方法同上。于妊娠4、5日，每日皮下注射天花粉0.625mg/kg，同時(shí)皮下注射l5-甲-PGF2a0.0125mg/kg，每日上、下午各1次。已知該劑量15-甲-PGF2a對(duì)早孕小鼠妊娠抑制率為20%。至妊娠8日解剖，記錄妊娠動(dòng)物數(shù)。結(jié)果如表3所示。天花粉與15-甲-PGF2a合并用藥組，所有12只小鼠均不妊娠。二藥合用所得的小鼠妊娠抑制率為100%（即ED100）。這表明15-甲-PGF0.0125mg/kg與天花粉0.625mg/kg合用時(shí)，抗早孕作用不是相加，而是增加。

1.6.結(jié)晶天花粉蛋白脂質(zhì)體對(duì)小鼠的抗早孕作用：

選取6-8周體重20-22g健廉雌鼠，按雌雄2：1合籠，發(fā)現(xiàn)陰栓者為妊娠第一天。將見(jiàn)栓的雌鼠隨機(jī)分組，每組10-15只。于妊娠第六天按下列實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)組給藥：第1組結(jié)晶天花粉蛋白脂質(zhì)體（Trichosanthin一Liposome，TL），劑量為每只小鼠注射TL2ug，4ug與8ug，第2組每只注射天花粉40ug；第3組每只注射空白脂質(zhì)體0.5ml；第4組每只注射鹽水0.5ml，作為正常對(duì)照。注藥后d5解剖小鼠，觀察其子宮胚胎發(fā)育情況。結(jié)果表明，TL抗早孕劑量為2ug/只，而單純天花粉劑量為40ug/只，其抗早孕率各為66.7%與70%。說(shuō)明小劑量TL即有明顯的抗早孕活性。TL體外釋放試驗(yàn)證實(shí)，6小時(shí)其釋放率為4.6%，72小時(shí)達(dá)68.2%。提示脂質(zhì)體在節(jié)胃藥物以及避孕研究的應(yīng)用是大有可為的。

1.7.天花粉脂質(zhì)體對(duì)早孕鼠血清孕酮水平的影響：

取妊娠6日的小鼠腹腔分別注射不同劑量TL溶液，注藥后5日，眼眶放血，收集血清。以放射免疫測(cè)定分析孕酮水平。妊娠鼠TL抗早孕的血清孕酮變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，用藥組與對(duì)照組比血清孕酮含量差異顯著（P<0.01）。TL和天花粉所得數(shù)值比較接近，但空白脂質(zhì)體在早孕過(guò)程中孕酮含量無(wú)明顯變化。關(guān)于天花粉的引產(chǎn)原理，根據(jù)目前的研究情況可以歸納為：天花粉蛋白能直接作用于胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞、并有一定的細(xì)胞專(zhuān)一性；能選擇性地使胎盤(pán)絨毛合體滋養(yǎng)層細(xì)胞變性壞死，解體的細(xì)胞碎片留在血竇中，引起凝血造成循環(huán)障礙和進(jìn)一步的大量組織壞死。胎盤(pán)絨毛的損傷反映在功能方面，即絨毛膜促性腺激素（HCG）和甾體激素迅速下降到流產(chǎn)的臨界水平以下。由于胎盤(pán)形態(tài)和功能?chē)?yán)重?fù)p傷的結(jié)果，破壞了母體與胎兒之間的內(nèi)分泌關(guān)系和代謝物的交換，并可能通過(guò)尚未弄清楚的機(jī)制引起前列腺素合成的增加，發(fā)動(dòng)宮縮而導(dǎo)致流產(chǎn)。此外，天花粉能使小鼠離體子宮、兔在體子宮收縮增強(qiáng)，并能提高子宮對(duì)垂體后葉素的敏感性，其對(duì)子宮平滑肌的直接興奮作用，可能也是導(dǎo)致流產(chǎn)的因素之一。

2.抗癌作用

2.1.對(duì)小白鼠早期移植肝癌腹水型治療作用：

選擇18-22g健康小白鼠皮下注射瘤細(xì)胞懸液（原倍或1：1）0.2ml/只，24小時(shí)后稱(chēng)重隨機(jī)分組。治療組皮下注射天花粉0.2ml/只（5mg/kg），間隔4-6日再按原劑量皮下注射天花粉1次。對(duì)照組小白鼠皮下注射生理鹽水0.2ml2次，間隔時(shí)間同治療組。

同時(shí)對(duì)治療組與對(duì)照組分別抽取1ml/只腹水進(jìn)行細(xì)胞病理學(xué)檢查，觀察細(xì)胞總數(shù)和細(xì)胞分類(lèi)。結(jié)果表明天花粉治療腹水型肝癌，可使腹水量減少，生存期延長(zhǎng)：實(shí)驗(yàn)按天花粉皮下注射2針的方案重復(fù)2批。生存期延長(zhǎng)率達(dá)61-76%，體重增加比對(duì)照組少，說(shuō)明治療組腹水量少，生存期平均29-30日，最長(zhǎng)者達(dá)60日還未見(jiàn)腹水生長(zhǎng)而處死。生存期比對(duì)照組明顯延長(zhǎng)，差別顯著P<0，05（見(jiàn)表5）。治療組小白鼠大多數(shù)未見(jiàn)腹水產(chǎn)生，最后都死于毒性反應(yīng)，偶見(jiàn)個(gè)別小白鼠有少量腹水，病理檢查表明腹水中總細(xì)胞數(shù)少，絕大多數(shù)為淋巴細(xì)胞，并出現(xiàn)淋巴細(xì)胞包圍癌細(xì)胞的所謂衛(wèi)星現(xiàn)象，還有中性白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。對(duì)照組最后由于肝癌大量腹水衰竭死亡，腹水中細(xì)胞總數(shù)多，絕大部分是癌細(xì)胞。第3批治療實(shí)驗(yàn)，改為癌細(xì)胞接種后24小時(shí)皮下注射天花粉0.2ml/只1次，不再治療，實(shí)驗(yàn)說(shuō)明治療組生存延長(zhǎng)率地可達(dá)85.6%，但治療組小白鼠也長(zhǎng)腹水，最后都死于肝癌。

2.2.對(duì)小白鼠晚期移植肝癌腹水型治療作用：

選擇18-22g小鼠皮下注射瘤細(xì)胞懸液（1：1），24小時(shí)稱(chēng)重隨機(jī)分組，間隔6日腹水已長(zhǎng)成，稱(chēng)重后治療組皮下注射天花粉0.2ml/只，間隔4日稱(chēng)重后皮下注射天花粉0.4或0.2ml/只，對(duì)照組皮下注射生理鹽水0.2m1/只，間隔時(shí)間同治療組。結(jié)果天花粉注射1次后腹水量明顯減少，腹水抑制率達(dá)73%（P<0.05）

2.3.對(duì)小白鼠肝癌實(shí)體瘤型的治療作用：

實(shí)驗(yàn)方法同上，結(jié)果顯示天花粉對(duì)小白鼠肝癌實(shí)體瘤抑制率可達(dá)36-38.9%，治療組瘤體明顯小于對(duì)照組（P<0.05）。

2.4.結(jié)晶天花粉蛋白對(duì)體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞的抑制作用：

Jar細(xì)胞培養(yǎng)于含10胎牛血清的RPMI1640人工培養(yǎng)液，加有青鏈霉素各100ug/ml。Hela和Fib細(xì)胞用DMEM培液，其中胎牛血清和青、鏈霉素含量同前。以上3種細(xì)胞均呈單層貼壁生長(zhǎng)。按文獻(xiàn)37方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，結(jié)晶天花粉蛋白對(duì)Jar人絨癌細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用，培育48小時(shí)后的皮內(nèi)注射50為3.3ug/ml，而Hela人宮頸癌細(xì)胞和正常纖維細(xì)胞的皮內(nèi)注射50分別為13.0和16.0ug/ml。此外，結(jié)晶天花粉蛋白對(duì)Jar細(xì)胞的hCG分泌顯示更強(qiáng)的抑制作用，培養(yǎng)48小時(shí)后，抑制50%，hCG分泌的結(jié)晶天花粉濃度為1.3ug/ml。

2．5.另有報(bào)道，天花粉溫浸冷凍干燥劑和水浸劑，對(duì)子宮癌U-14的抑制率分別為40.4%和30.9%，而煎劑對(duì)子宮U-14無(wú)作用。近年報(bào)道天花粉能抑制艾氏腹水癌

細(xì)胞生長(zhǎng)，延長(zhǎng)荷瘤小鼠的存活期。

3.對(duì)免疫功能的影響

3.1.天花粉對(duì)荷瘤小鼠紅細(xì)胞免疫功能的影響：

健康昆明種雄性小鼠，2-3月齡，體重21.3±4.6g，天花粉組和腫瘤小組小鼠腹腔接種細(xì)胞癌細(xì)胞懸液，正常組皮下注射等體積生理鹽水。天花粉組于接種24小時(shí)后皮下注射天花粉0.2ml（0.2mg）。其他組給予等體積生理鹽水。各組動(dòng)物于接種腫瘤后ll日分別摘眼球取血，RCIA紅細(xì)胞完全結(jié)上一個(gè)以上酵母細(xì)胞為一花結(jié)，CIC以1：8稀釋度出現(xiàn)（++）為陽(yáng)性。由表7可知，天花粉組與正常組小鼠的紅細(xì)胞C3b受體花結(jié)（RBC-RR）在同一水平，腫瘤組明顯降低，其差異非常顯著（P<0.01），表明荷瘤小鼠紅細(xì)胞C3b受體活性明顯受損，經(jīng)天花粉治療后，可使其恢復(fù)至正常水平；天花粉組小鼠紅細(xì)胞免疫復(fù)合物花結(jié)（RBC-ICR）增高，與其他兩組均有顯著差異（P<0.01），提示天花粉可增強(qiáng)荷瘤小鼠紅細(xì)胞粘附免疫復(fù)合物的能力。這一結(jié)果與CIC測(cè)定相一致。并與文獻(xiàn)報(bào)道互為印證。

3.2.天花對(duì)小鼠唾液腺內(nèi)凝集素受體和免疫球蛋白的影響：

動(dòng)物為20只成年雄性健康ICR純系小鼠，體重18-22g，分為2組，每組10只，第1組為天花粉組，每日1gl次，每次0.5ml（濃度65mg/ml），共7日，藥液的制備用常規(guī)水提法進(jìn)行，第2組為對(duì)照組，每日皮下注射l次，每次0.5ml生理鹽水。8日，殺死小鼠，取其唾液腺，分別作HE和其它染色。結(jié)果表明，小鼠頜下腺內(nèi)PNA，PBA受體顯著增加，IgG明顯增多、酸性粘多糖也高于對(duì)照組，提示天花粉與促進(jìn)唾液腺內(nèi)半乳糖和乙胺半乳糖的合成以及增加機(jī)體免疫功能有關(guān)。

4.抗菌及抗病毒作用

天花粉煎劑在體外對(duì)溶血性鏈球菌、肺炎雙球菌、白喉?xiàng)U菌有一定的抑制作用，對(duì)傷寒桿菌、綠膿桿菌、痢疾桿菌、變形桿菌及金黃色葡萄球菌的作用均較弱。采用病變抑制法和125I放射免疫法在3種細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)上測(cè)定了天花粉蛋白對(duì)7種病毒的抑制作用。結(jié)果表明，天花粉蛋白濃度在10ug/ml以下時(shí)，對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯的毒性作用，在0.001-10ug/ml時(shí)對(duì)乙型腦炎、柯薩奇B2、麻疹、腺病毒3型單純皰疹病毒I型、水泡性口炎病毒及乙型肝炎病毒等均有明顯的抑制作用，并且這種抑制作用隨天粉蛋白的濃度增大而提高。濃度在0.01ug/ml時(shí)可以抑制由100TC皮內(nèi)注射50病毒引起細(xì)胞病變的50%、提示，天花粉可能是繼干擾素之后另一種具有廣譜抗毒作用的蛋白質(zhì)。

5.抗艾滋病病毒

體外實(shí)驗(yàn)表明，天花粉蛋白可抑制艾滋病病毒（HIV）在感染的免疫細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制，減少免疫細(xì)胞中受病毒感染的活細(xì)胞數(shù)，其有效抑制濃度為0.05-10ug/ml。一種能抑制HIV感染和復(fù)制的蛋質(zhì)稱(chēng)為抗-HIVTA29。臨床資料亦表明有一定的治療效果。