尿液干化學(xué)分析原理及其臨床意義

2017-11-23 16:51 來(lái)源：

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尿液干化學(xué)分析原理及其臨床意義是醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技師考試可能涉及到的知識(shí)點(diǎn)，醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編整理了相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，供考生參考。

尿液的干化學(xué)分析在各級(jí)醫(yī)院甚至診所的應(yīng)用已經(jīng)十分普遍，各品牌的尿分析儀及其配套試紙雖略有差異，項(xiàng)目代碼也略有不同，但檢測(cè)原理基本相同：

一、葡萄糖（GLU）

[反應(yīng)原理]：采用酶法測(cè)試，用兩種酶，分別是葡萄糖氧化酶和過(guò)氧化氫酶。主要反應(yīng)過(guò)程如下：

現(xiàn)在幾乎所有的試紙都是采用酶法，因?yàn)槊阜ň哂刑禺愋詮?qiáng)、靈敏度高、反應(yīng)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)。不同型號(hào)的試紙所選用的指示劑有所不同。

[臨床意義]：

1. 生理性糖尿?yàn)橐贿^(guò)性糖尿，是暫時(shí)性的，排除生理因素后恢復(fù)正常。主要有三種：①飲食性糖尿，即在短時(shí)間內(nèi)服用大量糖類，引起血糖濃度過(guò)大；②應(yīng)急性糖尿，在腦外傷、腦血管意外、情緒激動(dòng)、劇烈運(yùn)動(dòng)周期性四肢麻痹等情況下，延腦糖中樞受刺激，使腎上腺激素或胰島素分泌異常，可出現(xiàn)暫時(shí)性的糖尿；③妊娠中后期多可見(jiàn)糖尿。

2. 病理性糖尿也可分為三種：①真性糖尿，既胰島素的分泌量相對(duì)或絕對(duì)不足，使血糖濃度超過(guò)腎糖閾尿糖檢查不僅可以診斷糖尿病，還可以指導(dǎo)臨床醫(yī)生決定胰島素的用量、判斷療效；②腎性糖尿，即腎小管對(duì)葡萄糖的重吸收功能減退，新生兒的近曲小管功能未完善也能出現(xiàn)糖尿；③其他糖尿，如生長(zhǎng)激素過(guò)多（肢端肥大癥）、甲狀腺激素過(guò)多（甲亢）、腎上腺激素過(guò)多（嗜鉻細(xì)胞瘤）、皮質(zhì)醇（Cμshing綜合癥）、胰高血糖素等都可使血糖濃度高過(guò)腎糖閾而出現(xiàn)糖尿；另外，肥胖病、高血壓也可能出現(xiàn)糖尿。

[注意事項(xiàng)]：

1. 因?yàn)槟蛱欠治鲈嚰埖暮笠徊椒磻?yīng)是氧化還原反應(yīng)，當(dāng)尿液中含有比色素還原能力更強(qiáng)的物質(zhì)時(shí)，可使測(cè)試結(jié)果偏低甚至出現(xiàn)假陰性。如尿液中含有維生素C時(shí)就能使測(cè)試結(jié)果偏低甚至假陰性。

2. 抗生素對(duì)班氏法糖定性、糖定量測(cè)定結(jié)果都有一定的影響，而對(duì)干化學(xué)法的測(cè)試結(jié)果無(wú)影響。尿液存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也能使尿糖被細(xì)菌分解使?jié)舛认陆?，但含有抗生素時(shí)幾乎不下降。

3. 高濃度的酮體尿可引起假陰性；尿液比重增高，可降低試劑帶對(duì)尿糖的敏感性；服用大量左旋多巴時(shí)，該藥物的代謝產(chǎn)物會(huì)對(duì)測(cè)試反應(yīng)產(chǎn)生抑制作用，使測(cè)試結(jié)果偏低或出現(xiàn)假陰性；尿液被過(guò)氧化物或次氯酸鹽等強(qiáng)氧化性物質(zhì)污染的時(shí)候能出現(xiàn)假陽(yáng)性。

4. 試劑帶采用的使酶促反應(yīng)，測(cè)定的結(jié)果和溫度及時(shí)間有關(guān)，因此應(yīng)在規(guī)定的溫度和時(shí)間內(nèi)測(cè)定。

二、膽紅素（BIL）、尿膽原（URO）

[膽紅素反應(yīng)原理]：在酸性條件下，重氮鹽作用于膽紅素的中央，使其斷開(kāi)并與重氮鹽偶合形成2分子的偶氮膽紅素，從而產(chǎn)生顏色變化。

[尿膽原反應(yīng)原理]：尿膽原分析試紙的反應(yīng)原理一般有兩種，一種是尿膽原在酸性條件下與對(duì)-二甲氨基苯甲醛發(fā)生醛化反應(yīng)（即尿膽原與醛縮合生成紅色的縮醛化合物，既常見(jiàn)的歐氏試劑）。另一種是重氮鹽法，即尿膽原在酸性條件下，與重氮鹽偶聯(lián)生成紫紅色的偶氮化合物。

[臨床意義]：

1. 膽紅素的檢測(cè)對(duì)肝膽系統(tǒng)疾病的診斷有重要價(jià)值。尿膽原更加靈敏的反映肝功能。

2. 膽紅素的檢測(cè)有助于診斷黃疸。在敗血癥、蠶豆病、異型輸血等情況下使紅細(xì)胞大量破壞，產(chǎn)生溶血性黃疸，此時(shí)雖然膽紅素大量增加，但大部分是間接膽紅素，因此，尿中的膽紅素還是陰性。

3. 膽素原族的檢測(cè)可以敏感的反映肝細(xì)胞功能，臨床經(jīng)驗(yàn)表明，在病毒性肝炎早期未出現(xiàn)黃疸前，尿中的膽素原族就已經(jīng)明顯增加。與膽紅素結(jié)合可以為診斷黃疸的類型提供依據(jù)。黃疸大致可分為三類：①肝前性黃疸，或稱溶血性黃疸，②肝原性黃疸，或稱肝細(xì)胞性黃疸，是在感染（如病毒性肝炎）、中毒及肝硬化等情況下，肝細(xì)胞或肝內(nèi)毛細(xì)膽管大量病變，使肝細(xì)胞對(duì)膽紅素?cái)z取、結(jié)合、轉(zhuǎn)運(yùn)及排泄障礙所致；③肝后性黃疸，或稱梗阻性黃疸，由于結(jié)石、腫瘤或先天性膽道閉鎖等原因造成總膽管梗阻所致。

[注意事項(xiàng)]：

1. 標(biāo)本必須新鮮，以免膽紅素被氧化成膽綠素，強(qiáng)烈的陽(yáng)光會(huì)加速此反應(yīng)。放置時(shí)間長(zhǎng)可使尿膽原氧化成尿膽素。

2. 尿液中含有高濃度的維生素C或亞硝酸鹽時(shí)，會(huì)抑制重氮偶合反應(yīng)，可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。當(dāng)病人接受大劑量氯丙嗪治療或尿中含有鹽酸苯偶氮吡啶的代謝產(chǎn)物時(shí)，可呈假陰性。

3. 由于分析試紙無(wú)尿膽原陰性的梯度，因此，分析試紙不能用來(lái)檢測(cè)尿膽原的減少或消失。

4. 尿液中的一些內(nèi)源性物質(zhì)如膽色素原、吲哚、膽紅素等，可是測(cè)試結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性；一些藥物如吩噻嗪等可產(chǎn)生顏色干擾。另外，尿液中含有大量維生素C或亞硝酸鹽時(shí)，可抑制重氮偶合反應(yīng)，使測(cè)試結(jié)果偏低甚至出現(xiàn)假陰性。

三、酮體（KET）

[反應(yīng)原理]：尿酮體包括乙酰乙酸、丙酮、β-羥丁酸，后者雖不屬于酮類，但經(jīng)常與前兩者伴隨出現(xiàn)，因而統(tǒng)稱為酮體。反應(yīng)原理是在堿性條件下，尿中的乙酰乙酸、丙酮與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)，生成紫紅色的復(fù)合物。這種測(cè)試方法對(duì)乙酰乙酸的敏感度為5～10mg/dl，對(duì)丙酮的敏感度為40～70mg/dl，并且不與β-羥丁酸反應(yīng)。

[臨床意義]：

1. 糖尿病酮癥酸中毒。糖利用減少，脂肪分解產(chǎn)生過(guò)量酮體，尿酮體的檢查對(duì)未控制或治療不當(dāng)?shù)?a href="http://bhshhw.cn/jibing/tangniaobing/" target="_blank" title="糖尿病" class="hotLink">糖尿病出現(xiàn)酸中毒或昏迷的診斷很有價(jià)值，可以與低血糖、心腦疾病酸中毒或高血糖滲透性糖尿病昏迷相區(qū)別。

2. 感染性疾?。ㄈ绶窝住?、敗血癥、結(jié)核等發(fā)熱期），嚴(yán)重嘔吐、腹瀉，長(zhǎng)期饑餓、禁食，全身麻醉后等都可能出現(xiàn)酮尿。另外婦女孕期因妊娠反應(yīng)嘔吐多、進(jìn)食少，體脂肪代謝明顯增多，也能出現(xiàn)酮尿。

3. 氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等情況也能出現(xiàn)酮尿。

4. 服用雙胍類降糖藥如降糖靈后，由于藥物抑制細(xì)胞呼吸，也可能出現(xiàn)酮尿。

[注意事項(xiàng)]：

1. 由于尿酮體中的丙酮和乙酰乙酸都是揮發(fā)性物質(zhì)；乙酰乙酸受熱易分解成丙酮；尿液被細(xì)菌污染后，酮體消失，因此，尿樣必須新鮮，檢測(cè)應(yīng)該及時(shí)，以免測(cè)試結(jié)果偏低或出現(xiàn)假陰性。

2. 干化學(xué)法測(cè)定酮體時(shí)對(duì)乙酰乙酸的敏感度約是丙酮的7～10倍，因此，與其他的檢測(cè)方法存在一定的差別 .

四、比重（SG）

[反應(yīng)原理]：尿液比重試紙的反應(yīng)原理是離子交換法，高分子電解質(zhì)—甲基乙烯基醚和順丁烯二酸的共聚體是弱酸性（—COOH基）離子交換體，而尿液中以鹽的形式存在的電解質(zhì)（M+X-），在尿液中離解釋放出M+陽(yáng)離子（以Na+為主），與離子交換體中的氫離子置換釋放出H+離子，而H+離子使pH指示劑溴麝香草酚藍(lán)產(chǎn)生顏色變化。（顏色由綠到黃的變化）

[臨床意義]：尿液比重的測(cè)定可以估計(jì)腎臟濃縮功能。由于尿液比重還受年齡、飲水量、出汗等因素的影響，故多次測(cè)定比單次測(cè)定更能反映腎臟濃縮功能。

[注意事項(xiàng)]：

1. 尿液標(biāo)本必須新鮮，不能含有強(qiáng)堿、強(qiáng)酸等物質(zhì)（如奎寧、嘧啶等藥物），這些物質(zhì)的存在都會(huì)影響尿液比重的測(cè)定。當(dāng)尿液pH大于7時(shí)，應(yīng)在測(cè)定結(jié)果上加上0.005作為強(qiáng)堿尿的校正。在尿液分析儀上一般都有自動(dòng)校正功能。

2. 尿液分析試紙實(shí)際上測(cè)定是尿液中的離子濃度，尿液中的非離子化合物（如葡萄糖、造影劑等）對(duì)測(cè)定結(jié)果必然有一定的影響。

五、潛血（BLD）

[反應(yīng)原理]：尿液潛血分析試紙的反應(yīng)原理是利用血紅蛋白中的亞鐵血紅素的假過(guò)氧化物酶活性催化分解過(guò)氧化物，產(chǎn)生新生態(tài)的氧，氧化指示劑，使指示劑顯色，從顯色的強(qiáng)度可以得知尿液中血的濃度。

[臨床意義]：

1. 尿液中混有0.1%以上的血液時(shí)，便呈肉眼血尿的特征，血量在此以下便只能用潛血反應(yīng)或尿沉渣鏡檢才能證明。血尿常見(jiàn)于尿路炎癥（急性腎炎、腎結(jié)核、尿道炎等）、結(jié)核、腫瘤，有白細(xì)胞時(shí)則表示有炎癥；蛋白陽(yáng)性、尿沉渣中有腎上皮細(xì)胞、管型等時(shí)，應(yīng)考慮腎炎；特別是有紅細(xì)胞管型時(shí)，是腎實(shí)質(zhì)出血的佐證。

2. 血紅蛋白尿見(jiàn)于發(fā)作性血紅蛋白尿癥，還見(jiàn)于各種中毒、感染、鏈球菌敗血癥、瘧疾（黑水熱）、灼傷、溶血性輸血反應(yīng)等情況。

[注意事項(xiàng)]：

1. 成年女性的經(jīng)血?？梢饻y(cè)試結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性，因此應(yīng)采取必要的采尿措施以減少污染。

2. 分析試紙不僅可以測(cè)試紅細(xì)胞，還能測(cè)試血紅蛋白，因此，當(dāng)血紅蛋白破裂時(shí)，可引起試紙測(cè)試結(jié)果與鏡檢結(jié)果的不一致，應(yīng)加以區(qū)別。

3. 尿液中含有對(duì)熱不穩(wěn)定酶、肌紅蛋白或菌尿，可引起假陽(yáng)性；尿液中含有大量維生素C時(shí)，可以抑制后一步反應(yīng)的進(jìn)行，使測(cè)試結(jié)果偏低甚至出現(xiàn)假陰性，因此，測(cè)試時(shí)應(yīng)使用具有抗維生素C干擾能力的分析試紙。

六、酸堿度（pH）

[反應(yīng)原理]：pH試紙的應(yīng)用是非常廣泛的，pH的反應(yīng)原理是基于pH指示劑法，目前，一般的尿液pH分析試紙中含有甲基紅[pH4.2（紅）～6.2（黃）]，溴甲酚綠[pH3.6（黃）～5.4（綠）]溴百里香酚藍(lán)[pH6.7（黃）～7.5（藍(lán)）]，這些混合的酸堿指示劑適量配合可以反映尿液pH4.5～9.0的變異范圍。

[臨床意義]：

正常尿液呈弱酸性，約為6.0，因食物的不同，pH的變化范圍為4.5～8.0.pH測(cè)定結(jié)果的判斷比其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判斷要難一些，因?yàn)槟蛞簆H的波動(dòng)幅度大而快，而正常尿和病人的尿的pH沒(méi)有明顯的差別，所以pH單獨(dú)使用的意義不大。但與其他臨床資料配合起來(lái)分析，則可成為重要的資料。

[注意事項(xiàng)]：

1. 檢測(cè)時(shí)尿標(biāo)本必須新鮮，放置過(guò)久細(xì)菌分解尿液成分可導(dǎo)致尿液pH改變。大多數(shù)情況下，細(xì)菌分解尿素產(chǎn)生氨，使尿液呈堿性；少數(shù)情況下，細(xì)菌也分解尿液成分產(chǎn)生酸性物質(zhì)，使尿液pH偏酸。

2. 當(dāng)腎臟分泌的尿液含有過(guò)多的碳酸氫鹽和碳酸緩沖對(duì)時(shí)，放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，使尿液中的二氧化碳自然擴(kuò)散到空氣中，使尿液pH增高。

3. 在測(cè)定過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間將試劑帶浸泡尿液標(biāo)本中，浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，尿pH呈減低趨勢(shì)。

七、蛋白質(zhì)（PRO）

[反應(yīng)原理]：蛋白誤差法，某種特定的pH指示劑陰離子受蛋白質(zhì)陽(yáng)離子吸引，進(jìn)一步電離，使指示劑的變色點(diǎn)發(fā)生改變，這種方法稱為蛋白誤差法。尿試紙中含有四溴酚藍(lán)（TBPH）指示劑和pH為3的緩沖體系，TBPH的變色點(diǎn)在pH3～4之間，它在尿中解離成陰離子，與蛋白質(zhì)陽(yáng)離子結(jié)合后呈黃色。

[臨床意義]：檢驗(yàn)?zāi)蛞旱鞍资桥R床尿液常規(guī)化學(xué)檢查之一，尿液蛋白試制主要檢測(cè)的是尿液中的白蛋白。正常情況下，健康成人每日排出的蛋白質(zhì)含量極少（約為30～120mg），一般的常規(guī)定性方法都不能檢測(cè)出來(lái)。一旦尿液蛋白含量>100mg/L或>150mg/24h尿，尿液蛋白質(zhì)定性實(shí)驗(yàn)便呈陽(yáng)性反應(yīng)而稱為蛋白尿。蛋白尿主要反映腎小球（管）損害及腎小球?yàn)V過(guò)率的增加。

[注意事項(xiàng)]：

1. 尿液標(biāo)本必須新鮮，變質(zhì)的尿液會(huì)使尿液的pH值產(chǎn)生變化。尿液本身過(guò)酸會(huì)出現(xiàn)假陰性、過(guò)堿會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性，緩沖體系適合檢測(cè)的pH范圍為3～7.5.例如含有奎寧、奎寧丁和嘧啶等藥物時(shí)，尿液呈堿性（pH>8.0），超過(guò)了試紙本身的緩沖能力，可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

2. 尿液分析試紙中的TBPH對(duì)于白蛋白的敏感性遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其他蛋白，因此，在尿液中僅含有其他種類的蛋白時(shí)，該方法的測(cè)試結(jié)果可能為陰性。

3. 試紙條不能長(zhǎng)時(shí)間浸泡于尿液中，否則由于試劑溶于尿液中導(dǎo)致失效而出現(xiàn)假陰性。

4. 多種物質(zhì)（大多為藥物）對(duì)尿蛋白的測(cè)定結(jié)果都有影響，如青霉素可以使測(cè)試結(jié)果偏低甚至出現(xiàn)假陰性；季胺鹽、PVP（聚乙烯吡咯烷酮）、喹啉等可使試紙出現(xiàn)假陽(yáng)性；某些洗滌液污染尿液時(shí)，測(cè)試結(jié)果會(huì)偏低。另外，大量飲水會(huì)稀釋尿液，可能造成漏檢。

八、亞硝酸鹽（NIT）

[反應(yīng)原理]：尿液中的亞硝酸鹽與試紙塊中的對(duì)氨基苯砷酸或磺胺發(fā)生重氮化反應(yīng)，生成重氮鹽，生成的重氮鹽再與試紙上的N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽或四氫苯并喹啉-3-酚偶合生成紅色的偶氮化合物（蓋氏試劑法）。

[臨床意義]：正常情況下，尿液亞硝酸鹽的定性實(shí)驗(yàn)一般為陰性。當(dāng)泌尿系統(tǒng)受到感染時(shí)，由于細(xì)菌還原硝酸鹽生成亞硝酸鹽，因此檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，常見(jiàn)于大腸埃希氏菌引起的泌尿系統(tǒng)感染。尿液亞硝酸鹽檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)，預(yù)示著尿液中的細(xì)菌數(shù)量在10萬(wàn)/ml以上。

[注意事項(xiàng)]：

1. 當(dāng)尿液中缺少硝酸鹽時(shí)，即使有細(xì)菌感染也會(huì)出現(xiàn)陰性結(jié)果；尿液在體內(nèi)的留存時(shí)間太短會(huì)因?yàn)橄跛猁}來(lái)不及還原而得到陰性結(jié)果。

2. 留取標(biāo)本的樣杯必須清潔，并及時(shí)送檢，以免存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)使細(xì)菌生長(zhǎng)而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

3. 使用利尿劑后，尿中的亞硝酸鹽含量降低，可能出現(xiàn)假陰性；硝基呋喃可降低反應(yīng)的靈敏度；非那吡啶可引起假陽(yáng)性；使用抗生素后，細(xì)菌被抑制可出現(xiàn)假陰性；尿液中含有大量維生素C時(shí)，也可能出現(xiàn)假陰性。

4. 高比重尿可降低測(cè)試反應(yīng)的靈敏度，尿中的亞硝酸鹽離子小于1.0mg/l時(shí)，可能出現(xiàn)假陰性結(jié)果。

九、白細(xì)胞（LEC）

[反應(yīng)原理]：利用中性粒細(xì)胞內(nèi)酯酶催化水解試紙中的吲哚酚酯，產(chǎn)生游離酚，游離酚氧化偶合或與試紙中的重氮鹽偶合而顯色。

[臨床意義]：在各種尿路炎癥情況下，尿液中都可能出現(xiàn)白細(xì)胞。白細(xì)胞的干化學(xué)檢查可以和別的檢查項(xiàng)目一起對(duì)尿液進(jìn)行過(guò)篩檢查。

[注意事項(xiàng)]：

1. 分析試紙只與粒細(xì)胞漿內(nèi)的酯酶起作用，因此分析試紙只能測(cè)定粒細(xì)胞，不能測(cè)定淋巴細(xì)胞，在腎移植病人發(fā)生排異反應(yīng)時(shí)，尿中以淋巴細(xì)胞為主時(shí)，會(huì)得到假陰性結(jié)果，應(yīng)參考其他檢測(cè)方法如顯微鏡檢查，以做出正確的判斷。另外，白細(xì)胞破裂后，酯酶釋放到尿液中，干化學(xué)的檢測(cè)結(jié)果還能是陽(yáng)性，而鏡檢則為陰性。

2. 尿液被甲醛污染，或含有高濃度膽紅素，或使用某些藥物時(shí)可出現(xiàn)假陽(yáng)性；尿蛋白>5g/L，或尿液中含有大劑量先鋒IV；慶大霉素等藥物時(shí)，可使結(jié)果偏低或出現(xiàn)假陰性。

3. 尿液未混勻，尿分析儀的載物臺(tái)上有污染物等情況都會(huì)使結(jié)果產(chǎn)生偏差。

十、維生素C（VC）

[反應(yīng)原理]：利用VC的還原性，使氧化態(tài)的2，6-二氯酚靛酚變成還原態(tài)的2，6-二氯二對(duì)酚胺，使試紙顏色由粉紅色變成無(wú)色，顏色變化的強(qiáng)弱與尿中VC的濃度相關(guān)。

[臨床意義]：

1. 檢測(cè)尿液中維生素的含量可以測(cè)試人體的營(yíng)養(yǎng)狀況，口服維生素C 500mg后，尿維生素C排泄量在15～57μmol（3～10mg）每4h內(nèi)為正常；大于57μmol（10mg）每4h為充裕；小于17μmol（3mg）每4h為不足。

2. 尿液維生素C降低，常見(jiàn)于維生素C攝入量不足或壞血病。

3. 尿液維生素C長(zhǎng)期增高可能與腎結(jié)石形成有關(guān)。

4. 在尿液分析試紙中，VC試紙還可以判斷尿液中的VC對(duì)其他試紙的影響程度。

[注意事項(xiàng)]：

1. 分析試紙只能測(cè)定還原性的維生素C，可能與其他檢測(cè)方法的測(cè)試結(jié)果不同。

2. 在pH>4.0時(shí)，尿液中的酚和巰基化合物等內(nèi)源性物質(zhì)可干擾測(cè)試，使測(cè)試結(jié)果偏高；另外半胱氨酸、硫代硫酸鈉也干擾測(cè)試，使測(cè)試結(jié)果偏高。