抗凝劑種類很多,性質(zhì)各異,必須根據(jù)檢驗(yàn)止的適當(dāng)選擇,才能獲得預(yù)期的結(jié)果?,F(xiàn)將實(shí)驗(yàn)常用抗凝劑及其使用方法簡述如下:
1、乙二胺四乙酸(EDTA)鹽 EDTA有二鈉、二鉀和三鉀鹽。均可與鈣離子結(jié)全成螯合物,從而阻止血液凝固。
EDTA鹽經(jīng)1000C烘干,抗凝作用不變,通常配成15g/L水溶液,每瓶0.4ml,干燥后可抗凝5ml血液。EDTA鹽對(duì)紅、白細(xì)胞形態(tài)影響很小,根據(jù)國際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)公委員會(huì)(International committee standard of hematology ,ICSH)1993年文件建議,血細(xì)胞計(jì)數(shù)用EDTA二鉀作抗凝劑,用量為EDTA-K2.2H2O1.5-2.2Mg (4.45±0.85μmol)/ml血液。EDTA-NA與EDTA-K2對(duì)血細(xì)胞計(jì)數(shù)影響均較小,但二鈉溶解度明顯低于二鉀,有時(shí)影響抗凝效果,其他抗凝劑不適合于血細(xì)胞計(jì)數(shù)。EDTA影響小板聚集,不適合于作凝血象檢查和血小板功能試驗(yàn)。
2.枸椽酸鈉:枸椽酸鹽可與血中鈣離子形成可溶性螯合物,從而阻止血液凝固。
枸椽酸鈉有2Na3C6H5O7.和2Na3C6H5.11H2O等多種晶體。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l濃度),與血液按1:9或1:4比例使用。枸椽鈉對(duì)凝血V因子有較好的保護(hù)作用,使其活性減低緩,故常用于凝血象的檢查,也用于紅細(xì)胞沉降率的測(cè)定。因毒性小,是輸積壓保養(yǎng)中的成分之一。
由于枸椽酸鈉溶液是按體積肥比例加入血液內(nèi)達(dá)到抗凝目的的,而抗凝劑主要是作用于積壓漿成分,通常所謂的1:9比例抗凝的概念是提1份體積的抗凝劑作用9份紅細(xì)胞比積正常血液內(nèi)的血漿成分而言。所以臺(tái)果對(duì)貧血或紅細(xì)胞增多癥患者的血液仍按1:9的比例加入抗凝劑時(shí),就會(huì)發(fā)生抗凝劑足或相對(duì)過多,這將明顯地影響凝象檢查結(jié)果。為了避免這種現(xiàn)象,有文獻(xiàn)報(bào)道應(yīng)根據(jù)抗凝劑用量(ml)=0.00185×血量×(100—病人紅細(xì)胞比積%)這一公式,來計(jì)算抗凝劑的用量。
3.草酸鈉:草酸鹽可與血中鈣離子生成草酸鈣沉淀,從而阻止血液凝固。
草酸鈉通常用0.1mol/L濃度,與血液按1:9比例使用,過去主要用于凝務(wù)象檢查。實(shí)踐發(fā)現(xiàn)草酸鹽對(duì)凝備V因子保護(hù)功能差,影響凝血酶原時(shí)間測(cè)定效果;另外由于草酸鹽與鈣結(jié)合形成的是沉淀物,影響自動(dòng)凝血儀的使用,因此,多數(shù)學(xué)者認(rèn)為凝積壓象檢查選用枸椽酸鈉為抗凝劑更為適宜。
4.肝素:肝素廣泛在于肺、肝、脾等幾乎所有組織和血管周圍肥大細(xì)胞和暑堿性粒細(xì)胞的顆粒中。它是一種含硫酸基團(tuán)的粘多糖,是分散物質(zhì),平均分子量為15000(2000-40000)。肝素可加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)滅活絲氨酸蛋白酶,從而具有阻止凝血酶形成,對(duì)抗凝血酶和阻止血小板聚集等多種作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5Iu .盡管肝素可以保持紅細(xì)胞的自然形態(tài),但由于其??梢鸢准?xì)胞聚集關(guān)使用涂片在羅氏()染色時(shí)產(chǎn)生藍(lán)色背景,因此肝素抗凝血不適全血液學(xué)一般檢查。肝素是紅細(xì)胞透滲脆性試驗(yàn)理想的抗凝劑。
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