測(cè)定酶活性濃度的兩大類(lèi)方法分別是什么呢？跟著小編來(lái)學(xué)習(xí)一下吧！

1.固定時(shí)間法（取樣法、終點(diǎn)法、兩點(diǎn)法）

先讓酶與底物在一定溫度下作用一段固定的時(shí)間，然后停止酶反應(yīng)，加入試劑進(jìn)入化學(xué)反應(yīng)呈色測(cè)出底物和產(chǎn)物的變化。

用這類(lèi)方法測(cè)酶活性濃度，必須保證酶和底物在所選定的溫度下作用時(shí)間要很精確，否則將引起較大誤差。

該法最基本的一點(diǎn)是停止反應(yīng)后才測(cè)定底物或產(chǎn)物的變化。

2.連續(xù)監(jiān)測(cè)法（速率法）

連續(xù)監(jiān)測(cè)法具有測(cè)定準(zhǔn)確等眾多的優(yōu)點(diǎn)，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，自動(dòng)生化儀的使用，正在逐步取代“固定時(shí)間法”。實(shí)際工作中，測(cè)酶活性濃度常用酶偶聯(lián)法。

最簡(jiǎn)單的酶偶聯(lián)反應(yīng)為以下模式：

A：底物

B：待測(cè)酶產(chǎn)物（不能直接測(cè)定）

C：指示酶產(chǎn)物（可以直接測(cè)定）

Ex：待測(cè)酶

Ei：指示酶

如果一些酶反應(yīng)找不到合適的指示酶與其直接偶聯(lián)，可以加入另一種酶，將兩者連接起來(lái)，模式如下：

酶偶聯(lián)反應(yīng)與一般酶反應(yīng)的一個(gè)重要區(qū)別是有一個(gè)明顯的延滯期。從酶反應(yīng)開(kāi)始至穩(wěn)態(tài)期間，指示酶反應(yīng)較慢且不穩(wěn)定，稱(chēng)為延滯期。

反應(yīng)體系中不應(yīng)有中間產(chǎn)物堆積，否則將導(dǎo)致誤差。

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