免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)的組織處理如何進(jìn)行呢
免疫熒光組織化學(xué)技術(shù)的組織處理如何進(jìn)行呢?快來跟著小編了解一下吧!
(一)標(biāo)本的類型:
1.涂片和印片:血液、細(xì)菌培養(yǎng)物、腦脊液、體腔滲出液和細(xì)胞懸液等均可簡單地涂抹在玻片上,干燥固定后就可用于熒光抗體染色。腦脊液、臟器(肝、脾、淋巴結(jié)等)、細(xì)菌菌落或尸體病變組織可把新鮮切面壓印于玻片上做成印片,經(jīng)固定后再染色。
2.組織切片:最常用。包括:
①冷凍切片:首選的制片方法。優(yōu)點(diǎn):操作簡單,組織的抗原性保存好,自發(fā)熒光較少,特異熒光強(qiáng),同時適用于不穩(wěn)定的抗原;缺點(diǎn):組織結(jié)構(gòu)欠清晰;
②石蠟切片:研究形態(tài)學(xué)的主要制片方法,它不但是觀察組織結(jié)構(gòu)的理想方法,而且可進(jìn)行回顧性研究。其優(yōu)點(diǎn)是組織細(xì)胞的精細(xì)結(jié)構(gòu)顯現(xiàn)清楚,但對抗原的保存量不如冷凍切片,并有組織自發(fā)熒光和非特異性熒光,需加酶消化處理。
3.細(xì)胞培養(yǎng)標(biāo)本:細(xì)胞在玻片上培養(yǎng),形成單層,固定后用作抗核抗體等檢測的抗原片。還可使細(xì)胞單層生長在玻片上,再用病毒或患者標(biāo)本感染,然后固定,用熒光抗體染色法檢測病毒。
4.活細(xì)胞染色:檢查淋巴細(xì)胞表面抗原以及免疫球蛋白受體、癌細(xì)胞表面抗原、血清中抗癌細(xì)胞抗體等,均可用活細(xì)胞熒光抗體染色法。當(dāng)同時觀察細(xì)胞表面兩種抗原的分布和相互關(guān)系時,可用雙標(biāo)記法進(jìn)行染色。
(二)標(biāo)本的保存
標(biāo)本在固定干燥后,最好立即進(jìn)行熒光抗體染色及鏡檢。如必須保存時,則應(yīng)保持干燥,置4℃以下保存。一般細(xì)菌涂片或器官組織切片經(jīng)固定后可保存1個月以上。但病毒和某些組織抗原標(biāo)本抗原性喪失很快,數(shù)天后就失去其抗原性,需在-20℃以下保存。
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