酶聯(lián)免疫中什么是固相載體呢？快來跟著小編了解一下吧！

除均相酶免疫測定外，各種非均相酶免疫測定反應最后都需要分離游離和結合的酶標記物。

固相抗體或抗原就是把抗體或抗原結合到固相載體的表面上，是酶免疫技術中將游離和結合的酶標志物迅速分離的最常用方法。

（一）固相載體的要求　結合抗體或抗原的容量大；可將抗體或抗原牢固地固定在其表面，經(jīng)長期保存和多次洗滌也不易脫落；不影響所固定的抗體或抗原的免疫反應性，而且為使反應充分進行，最好其活性基團朝向反應溶液，固相方法簡便易行，快速經(jīng)濟。

（二）固相載體的種類和選擇

1.塑料制品：聚苯乙烯塑料最常采用。抗原或抗體以非共價或物理吸附方式結合到此載體上。

主要缺點是抗體（抗原）結合容量不高、固相抗體（抗原）脫吸附率較高且不均一，孔間變異大，重復性差，從而影響測定的靈敏度、精確度及檢測范圍。

目前采用非共價和化學偶聯(lián)共價吸附方法進行抗原或抗體的固相化可改善上述缺點

2.微粒：易與抗體（抗原）形成化學偶聯(lián)，且結合容量大。均勻地分散到整個反應溶液中，因此反應速度快?？芍瞥纱呕㈩w粒。自動化檢測中常用。

3.膜載體：常有硝酸纖維素膜（Nc）、玻璃纖維素膜及尼龍膜等通過非共價鍵吸附抗體（抗原），廣泛用于定性或半定量斑點ELISA的固相載體。

（三）包被與封閉

1.包被：將抗原或抗體結合在固相載體上的過程。普遍使用的聚苯乙烯載體，將抗原或抗體溶于緩沖液（常用為pH9.6的碳酸鹽緩沖液）中，加于ELISA板孔中4℃過夜。包被好的固相載體在低溫可放置一段時間而不失去免疫活性。

2.封閉：包被的蛋白質濃度過低，固相載體表面不能被此蛋白質完全覆蓋，其后加入的血清標本和酶結合物中的蛋白質也會部分地吸附于固相載體表面，最后產(chǎn)生非特異性顯色致本底偏高，在這種情況下，需用1%～5%的牛血清白蛋白或5%～20%小牛血清再包被一次，消除此干擾，此過程稱為封閉。

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