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1.載體

紅細(xì)胞是大小均一的載體顆粒，最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細(xì)胞及O凝型人紅細(xì)胞。

新鮮紅細(xì)胞能吸附多糖類抗原，但吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力較差。

致敏的新鮮紅細(xì)胞保存時(shí)間短，且易變脆、溶血和污染，只能使用2～3d.為此一般在致敏前先將紅細(xì)胞醛化，可長期保存而不溶血。

常用的醛類有甲醛、戊二醛、丙酮醛等。

紅細(xì)胞經(jīng)醛化后體積略有增大，兩面突起呈圓盤狀。醛化紅細(xì)胞具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)抗原或抗體的能力，血凝反應(yīng)的效果基本上與新鮮紅細(xì)胞相似。如用兩種不同醛類處理效果更佳。也可先用戊二醛，再用鞣酸處理。

醛化紅細(xì)胞能耐60C的加熱，并可反復(fù)凍融不破碎，在4℃環(huán)境中可保存3-6個(gè)月，在一20℃的環(huán)境中可保存1年以上。

2.致敏

致敏用的抗原或抗體要求純度高，并保持良好的免疫活性。

用蛋白質(zhì)致敏紅在低pH，低離子濃度下，用醛化紅細(xì)胞直接吸附即可。

間接法則需用耦聯(lián)劑將蛋白質(zhì)結(jié)合到紅細(xì)胞上。常用耦聯(lián)劑為雙耦氮聯(lián)苯胺(bis-diazotized benzidine，BDB)和氯化鉻。前者通過共價(jià)鍵，后者通過金屬陽離子靜電作用使蛋白質(zhì)與紅細(xì)胞表面結(jié)合而達(dá)到致敏的目

3.血凝

試驗(yàn)可在微量滴定板或試管中進(jìn)行，將標(biāo)本倍比稀釋，一般為1：64，同時(shí)設(shè)不含標(biāo)本的稀釋液對(duì)照孔。

在含稀釋標(biāo)本1滴的板孔(或試管)中，加入0.5%致敏紅細(xì)胞懸液1滴，充分混勻，置室溫1～2h，即可觀察結(jié)果。

凡紅細(xì)胞沉積于孔底，集中呈一圓點(diǎn)的為不凝集。如紅細(xì)胞凝集，則分布于孔底周圍。根據(jù)紅細(xì)胞凝集的程度判斷陽性反應(yīng)的強(qiáng)弱，以抖凝集的孔為滴度終點(diǎn)。

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