只要堅持、努力，勝利就會屬于你！“酶反應(yīng)”是檢驗職稱考試需要掌握的知識，那“酶反應(yīng)動力學(xué)的原理”是什么呢？以下是醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理的“酶反應(yīng)動力學(xué)的原理”相關(guān)知識，希望有助于大家備考！祝大家考試順利，取得好成績！

酶反應(yīng)動力學(xué)主要研究酶催化反應(yīng)的過程與速率，以及各種影響酶催化速率的因素，定量時的觀察對象是總單位時間內(nèi)底物的減少或產(chǎn)物增加的量。

影響酶作用的因素包括底物的濃度、酶反應(yīng)的最適pH、最適溫度、酶的抑制作用，另外還包括試劑中表面活性劑的作用等因素。

1.底物濃度的影響

在檢測試劑中底物濃度、輔因子、活化劑、復(fù)構(gòu)劑的種類和濃度均對酶的測定至關(guān)重要。其中以底物的種類和濃度最為重要。

底物濃度影響遵循米氏方程：

ν=V[S]/Km+[S]

當(dāng)?shù)孜餄舛冗h(yuǎn)遠(yuǎn)小于Km ，增加底物濃度，反應(yīng)速度增加。

當(dāng)?shù)孜颷S]＞＞Km 時，公式近似為ν=V，反應(yīng)速度不再增加，故此時反應(yīng)速度為最大反應(yīng)V。

從理論上說只有測定的是酶最大反應(yīng)V，反應(yīng)速度才和酶量成正比。

(1)底物的種類

若所測的酶專一性不強(qiáng)，可作用于多種底物，Km 最小的底物往往是此酶的生理底物。 (Km表示酶和底物的親和力，Km越小親和力越大)

如該酶測定主要用于臨床診斷工作，首先應(yīng)考慮有效診斷價值的底物。

選擇Km小的底物測定酶活性，在最大反應(yīng)速度時底物濃度也將最低。這意味著試劑成本可能較低，不易出現(xiàn)底物難溶解的困難。

(2)選擇底物的合適濃度

確定底物種類后，重要的是選擇底物的合適濃度。

米氏方程在選擇酶測定底物濃度有著重要的指導(dǎo)作用。

計算出某一酶的Km后就可以計算出不同底物濃度和Km間的比值，將其代入米氏方程就可以計算出此時酶促反應(yīng)速度相當(dāng)于最大反應(yīng)速度的百分比。

上述只能適應(yīng)用于單一底物的酶。

2.反應(yīng)體系的最適pH、緩沖液的種類和濃度

測定酶活性濃度時一定要選擇在最適pH。

因為此處酶反應(yīng)速度最大，測定靈敏度最高。此處酶活性變化的斜率最小，如反應(yīng)體系中出現(xiàn)pH變化時，對測定結(jié)果影響最小。

pH還可以影響酶的穩(wěn)定性。

為使反應(yīng)體系能穩(wěn)定在最適pH范圍，實際檢測時多采用不同類型、不同濃度的緩沖液。

3.溫度的控制

溫度對酶活性影響具有雙重性。

化學(xué)速度隨溫度升高而加快，酶反應(yīng)也不例外。

Q10值即溫度增加10℃，化學(xué)速度的變化率。酶的Q10值約在1.5～2.5。(溫度每增加10℃，酶促反應(yīng)速度增加1～2倍左右。)

當(dāng)溫度超過一定范圍，反應(yīng)速度下降，(酶蛋白變性)應(yīng)選最適反應(yīng)溫度。

37℃是目前使用最廣泛的測定酶催化活性濃度的溫度。

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