只要堅持、努力，勝利就會屬于你！“稀釋法藥敏試驗”是檢驗職稱考試需要掌握的知識，那“稀釋法藥敏試驗”是什么呢？以下是醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)小編為大家整理的相關(guān)知識，希望有助于大家備考！祝大家考試順利，取得好成績！

試驗原理：

將一定濃度的抗菌藥物稀釋至不同濃度后接種受試菌株，通過測定菌株在不同濃度藥物培養(yǎng)基內(nèi)的生長情況可定量檢測該藥物的最低抗菌濃度（MIC）、最小殺菌濃度（MBC）、可抑制50%受試菌的MIC（MIC50）、可抑制90%受試菌的MIC（MIC90）。

試驗步驟:

稀釋法藥敏試驗主要有試管肉湯稀釋法、微量肉湯稀釋法、瓊脂稀釋法等方法，其主要區(qū)別為培養(yǎng)基不同，但試驗步驟基本一致。

1.藥物稀釋

按照美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會（CLSI）制訂的指南進行藥物原液制備和稀釋。

2.菌液制備

挑取培養(yǎng)好的受試菌制備成0.5麥?zhǔn)蠁挝痪鷳乙骸?/p>

3.菌株接種

菌懸液配置完畢后15分鐘內(nèi)，按照試管肉湯稀釋法和微量肉湯稀釋法最終接種菌量為105CFU/ml，瓊脂稀釋法最終接種菌量為104CFU/點進行接種。

4.孵育培養(yǎng)

接種完畢后將培養(yǎng)基放入35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16~20小時。

嗜血桿菌屬、鏈球菌屬培養(yǎng)時間為20~24小時，苯唑西林和萬古霉素對葡萄球菌和腸球菌的培養(yǎng)時間為24小時。

5.結(jié)果分析

檢查對照組生長情況，以肉眼或比濁劑觀察讀取所需數(shù)據(jù)。

注意事項:

1.保證抗菌藥物質(zhì)量

抗菌藥物應(yīng)直接從廠商或相關(guān)機構(gòu)獲取，實際濃度依據(jù)說明書進行換算，藥品應(yīng)按照說明書要求或于-20℃下干燥冷藏，制備好的藥液應(yīng)無菌并至少為-60℃冷凍保存，融化后應(yīng)24小時內(nèi)使用，未使用的不可再次使用。

2.培養(yǎng)基的要求

肉湯稀釋法中，非苛養(yǎng)菌可選擇陽離子調(diào)節(jié)的MH肉湯，對苛養(yǎng)菌中有特殊要求的如嗜血桿菌屬、鏈球菌屬可分別選擇HTM培養(yǎng)基、含5%脫纖維馬血CAMHB。

瓊脂稀釋法中，一般選擇MHA瓊脂，特殊細菌如淋病奈瑟菌則用含1%生長因子的GC瓊脂。

檢測葡萄球菌對苯唑西林、甲氧西林、萘夫西林的敏感性時，培養(yǎng)基中須含有最終濃度為2%的NaCl。

3.結(jié)果分析

如結(jié)果觀察到跳孔現(xiàn)象應(yīng)檢查培養(yǎng)物純度或重新進行試驗。

臨床意義:

藥物最低濃度管無細菌生長者（對照管細菌生長良好），即為待檢菌的最低抑菌濃度（MIC）。

常規(guī)的稀釋法藥敏試驗操作步驟繁瑣，臨床應(yīng)用較少，多用于調(diào)查罕見耐藥；調(diào)查藥敏定性敏感而臨床療效不佳的原因；確定藥敏定性中介的敏感性；選擇二線藥物；新藥評價。

商品化的微量稀釋板操作方便，已廣泛應(yīng)用于臨床，可指導(dǎo)藥物劑量。

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