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重組DNA技術(shù)
【考頻指數(shù)】★★★
重組DNA技術(shù)是在人們對自然界基因轉(zhuǎn)移和重組的認識基礎(chǔ)上創(chuàng)立的新技術(shù)。自然界基因轉(zhuǎn)移伴發(fā)重組有幾種形式:位點特異的重組、同源重組及轉(zhuǎn)座重組。依賴整合酶、在兩個DNA序列的特異位點間發(fā)生的整合稱位點特異的重組。發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組,又稱基本重組。
一個完整的基因克隆過程應(yīng)包括:目的基因的獲取,克隆基因載體的選擇與改造,目的基因與載體的連接,重組DNA分子導(dǎo)入受體細胞,篩選出含感興趣基因的重組DNA轉(zhuǎn)化細胞。
癌基因與抑癌基因
【考頻指數(shù)】★★★
癌基因與抑癌基因的作用機制涉及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、基因表達調(diào)控以及其控制的細胞分裂和分化過程。
癌基因是指在體外引起細胞轉(zhuǎn)化,在體內(nèi)誘發(fā)腫瘤的基因。存在于生物正常細胞基因組中的癌基因又稱為原癌基因或細胞癌基因。在正常情況下,這些基因處于靜止或低表達的狀態(tài),對維持細胞正常功能具有重要作用。當(dāng)其受到體內(nèi)外致癌因素作用,發(fā)生過度表達或突變導(dǎo)致激活時,則可導(dǎo)致細胞癌變。
在某些條件下,如病毒感染、化學(xué)致癌物或輻射作用等,細胞癌基因結(jié)構(gòu)發(fā)生異常,被異常激活,使得細胞癌基因表達產(chǎn)物過多增加,導(dǎo)致細胞生長增殖和分化異常,部分細胞發(fā)生惡變而形成腫瘤。癌基因異常激活的主要方式為:獲得啟動子和(或)增強子;染色體易位;原癌基因擴增;點突變。腫瘤發(fā)生是一個多步驟的漸進過程,需要多種癌基因協(xié)同作用。
對于正常細胞,調(diào)控生長的基因(如細胞癌基因等)和調(diào)控抑制生長的基因(如抑癌基因等)的協(xié)調(diào)表達是控制細胞正常生長的重要分子機制之一。
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