醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)主管技師：《答疑周刊》2016年第23期：

【臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)】

學(xué)員提問：腎上腺皮質(zhì)功能減退，為什么氯減低？

解析：腎上腺皮質(zhì)功能減退時(shí)，由于醛固酮類皮質(zhì)激素分泌減少，腎小管再吸收鈉、氯不足，尿鈉與氯化物排出增多，引起血氯減低。

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學(xué)員提問：percoll分離法由上到下順序是？

解析：Percoll是經(jīng)過聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrolidone，PVP)處理的硅膠顆粒混懸液，對細(xì)胞無毒性和刺激性。Percoll混懸液的硅膠顆粒大小不一，經(jīng)過高速離心后，可形成一個(gè)連續(xù)密度梯度，將比重不同的細(xì)胞分離純化。

將1份10XPBS與9份Percoll貯存液混合，制成等滲Percoll懸液，此懸液被認(rèn)為是100%Percoll懸液，其密度為1.1294g/ml.用PBS或細(xì)胞培養(yǎng)液稀釋100%Percoll而獲得所需密度的Percoll分離液用于相應(yīng)細(xì)胞的分離。若分離淋巴細(xì)胞應(yīng)使用1.0777g/ml，配制時(shí)用稀釋液稀釋60%即可。

取比重1.077的Percoll分離液Xml與離心管中，將等倍稀釋的抗凝血1/2Xml小心疊加在分離液上，經(jīng)水平離心(1500rpm)后，便得四個(gè)細(xì)胞層，從而分離出淋巴細(xì)胞。表層為死細(xì)胞殘片和血小板，底層為粒細(xì)胞和紅細(xì)胞，中間有兩層，上層富含單核細(xì)胞，下層富含淋巴細(xì)胞。

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學(xué)員提問：離子交換層析的主要原理是利用物質(zhì)什么？

解析：離子交換層析是根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷的差異進(jìn)行分離純化的一種方法。蛋白質(zhì)的帶電性是由蛋白質(zhì)多肽中帶電氨基酸決定的。由于蛋白質(zhì)中氨基酸的電性又取決于介質(zhì)中的pH，所以蛋白質(zhì)的帶電性也就依賴于介質(zhì)的pH。當(dāng)pH較低時(shí)，負(fù)電基團(tuán)被中和，而正電基團(tuán)就很多； 在pH較高時(shí)，蛋白質(zhì)的電性與低pH時(shí)相反。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)所處的pH，使蛋白質(zhì)的正負(fù)電荷相等，此時(shí)的pH稱為等電點(diǎn)。離子交換層析所用的交換劑是經(jīng)酯化、氧化等化學(xué)反應(yīng)引入陽性或陰性離子基團(tuán)制成的，可與帶相反電荷的蛋白質(zhì)進(jìn)行交換吸附。帶有陽離子基團(tuán)的交換劑可置換吸附帶負(fù)電荷的物質(zhì)，稱為陰離子交換劑，如DEAE-纖維素樹脂；反之稱為陽離子交換劑，如CM-纖維素樹脂。不同的蛋白質(zhì)有不同的等電點(diǎn)，在一定的條件下解離后所帶的電荷種類和電荷量都不同，因而可與不同的離子交換劑以不同的親和力相互交換吸附。當(dāng)緩沖液中的離子基團(tuán)與結(jié)合在離子交換劑上的蛋白質(zhì)相競爭時(shí)，親和力小的蛋白質(zhì)分子首先被解吸附而洗脫，而親和力大的蛋白質(zhì)則后被解吸附和洗脫。因此，可通過增加緩沖液的離子強(qiáng)度和/或改變酸堿度，便可改變蛋白質(zhì)的吸附狀況，使不同親和力的蛋白質(zhì)得以分離。

【臨床免疫學(xué)和免疫檢驗(yàn)】

學(xué)員提問：老師你好，反向間接凝集反應(yīng)測的是抗體還是抗原？

解析：反向間接凝集反應(yīng)紅細(xì)胞包被抗體，用以檢測抗原的血凝反應(yīng)，稱為反向間接血凝反應(yīng)(RPHA)。

下列疾病不屬于Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的是()。

A、支氣管哮喘

B、藥物過敏性蕁麻疹

C、過敏性鼻炎

D、過敏性休克

E、血清病

【正確答案】 E

【答案解析】 IgE的Fc段能與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的受體結(jié)合，介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生，因此又稱親細(xì)胞抗體。IgE多由鼻腔、扁桃體、支氣管、胃腸道黏膜固有層的漿細(xì)胞所產(chǎn)生。Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病包括：支氣管哮喘、藥物過敏性蕁麻疹、過敏性鼻炎、過敏性休克等。

學(xué)員提問：血清病是幾型變態(tài)反應(yīng)？

解析：血清病屬于Ⅲ型超敏反應(yīng)。血清病是指因輸注異種血清導(dǎo)致的Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)。

【臨床血液學(xué)】

學(xué)員提問：Rh陰性血的母親，小孩Rh陽性,換血需要用陰性還是陽性的洗滌紅細(xì)胞？

解答：Rh陰性的洗滌紅細(xì)胞。

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