亞慢性毒性試驗最常用，重點介紹。

　　1.試驗期限

　　無完全統(tǒng)一的認(rèn)識。一般認(rèn)為在環(huán)境毒物中，需連續(xù)接觸3～6個月，但在工業(yè)毒物中1～3個月即可。（慢性：1年以上或2年）。

　　2.實驗動物選擇

　　一般要求選擇兩個動物種屬，即嚙齒類（如小鼠、大鼠）和非嚙齒類（如狗、猴）。大鼠常用Wistar和Sprague-Dawley品系。個體選擇一般選擇未成年的健康動物，大鼠80／100g（6～8周齡）。每組小動物數(shù)不少于20只，大動物不少于6～8只。如需要在實驗過程中處死部分動物，則每組動物數(shù)要相應(yīng)增加。性別為雌雄各半。（慢性：初斷乳的動物。大鼠40～60只）。

　　3.染毒途徑

　　染毒途徑的選擇應(yīng)盡量模擬人類在環(huán)境中接觸該受試物的途徑或方式，并與預(yù)期進(jìn)行慢性毒性試驗的接觸途徑相一致。

　　主要有經(jīng)消化道、經(jīng)呼吸道和經(jīng)皮膚三種。①經(jīng)消化道：大鼠灌胃法，食品用喂飼法，摻入量8g/100g.大動物通常使用膠囊法染毒；②經(jīng)呼吸道：染毒受試物濃度穩(wěn)定后，吸入時間2～6小時/天；③經(jīng)皮膚：每天染毒4～6小時，防舔食。每天染毒時間一致，宜上午，先給藥后進(jìn)食。

　　4.染毒劑量與分組

　　為了得到明確的劑量-反應(yīng)關(guān)系，一般至少設(shè)三個劑量組和一個陰性對照組。高劑量組應(yīng)能引起較為明顯的毒效應(yīng)，但無動物死亡或僅有個別動物死亡（＜10%）；中劑量組理想時相當(dāng)于LOAEL；低劑量組應(yīng)相當(dāng)于NOAEL。具體劑量可以l／20～1／5LD50為高劑量組劑量，高、中、低各劑量組間距在3～10倍之間，最低不小于2倍。（慢性：以LD50除以10、100、1000作為三劑量組劑量）。